造血幹細胞の細胞周期停止機構の解明-転写因子E2Fの役割-

阐明造血干细胞的细胞周期阻滞机制-转录因子E2F的作用-

基本信息

批准号：
10181221
负责人：
古川雄祐
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Jichi Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10181221/
关键词：
造血幹細胞細胞周期転写因子 E2F RB p130 インターフェロン

项目摘要

造血幹細胞のG0/G1期停止の分子機構につき、転写因子E2Fの役割を中心として研究を行い、以下のような結果を得た。(1) 造血幹細胞におけるE2Fの発現、機能とその調節機構の解明:正常骨髄由来のCD34陽性細胞におけるE2Fの発現をRT-PCRおよびgel-shift assayを用いて解析し、転写促進性のサブユニットであるE2F-1の抑制と転写抑制性のE2F-4/pRB、E2F-4/p130複合体の高発現があることを見い出した。このため造血幹細胞においては、E2F依存性の細胞周期調節因子であるcdc2、cyclinB、cyclinEなどの発現が抑制されており、細胞回転が停止していることが推測された(Blood投稿中)。終末分化上皮細胞ではこのようなパターンは認められず、血液幹細胞に特異的な現象と考えられた。さらに幹細胞において転写活性化ドメインを欠く特殊なサブユニットであるE2F-6の発現が高いことを見い出しており、現在その意義について解析中である。(2) 造血抑制サイトカインinterferon(IFN)による幹細胞増殖抑制におけるE2Fの役割:幹細胞の細胞周期停止にはIFNの作用が重要と考えられているが、IFNによる増殖抑制にE2Fが関与していることを見い出した。即ち、IFNは主要サブユニットであるE2F-1の活性を抑制することにより細胞をG0/G1期に停止させる(J.Biol.Chem.272:12406-12414,1997)。さらにその機序として、IFNによってE2F-1プロモーター上に転写抑制性複合体であるE2F-4/pRB、E2F-4/p130の形成が誘導され、その結果転写が抑制されることがわかった(Oncogene誌4月号に掲載予定)。

我们对造血干细胞G0/G1期阻滞的分子机制进行了研究，重点关注转录因子E2F的作用，得到了以下结果。 (1)阐明E2F在造血干细胞中的表达、功能和调控机制：我们利用RT-PCR和凝胶迁移实验分析了E2F在正常骨髓来源的CD34阳性细胞中的表达，并鉴定了转录我们发现 E2F-1 受到抑制，转录抑制性 E2F-4/pRB 和 E2F-4/p130 复合物高表达。因此，推测造血干细胞中，CDC2、cyclinB、cyclinE等E2F依赖性细胞周期调节因子的表达受到抑制，细胞旋转被阻滞（目前发布在Blood上）。在终末分化的上皮细胞中没有观察到这种模式，并且被认为是血液干细胞特有的现象。此外，我们发现E2F-6这种缺乏转录激活结构域的特殊亚基在干细胞中高表达，目前我们正在分析其意义。 (2)E2F在造血抑制性细胞因子干扰素(IFN)抑制干细胞增殖中的作用：虽然IFN的作用被认为对于干细胞的细胞周期停滞很重要，但E2F参与IFN对增殖的抑制。我发现了。也就是说，IFN通过抑制主要亚基E2F-1的活性将细胞阻滞在G0/G1期(J.Biol.Chem.272：12406-12414，1997)。此外，还发现其机制是IFN诱导E2F-1启动子上形成转录抑制复合物E2F-4/pRB和E2F-4/p130，从而导致转录抑制（预计发表于2017年4月号）癌基因杂志）。