単球性細胞株JOSK-Iの産生するIL-1の生理活性と臨床応用

单核细胞系JOSK-I产生IL-1的生理活性及临床应用

基本信息

批准号：
63015086
负责人：
古川雄祐
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Jichi Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.JOSK-I細胞が産生するIL-1の精製純化:単芽球性株化細胞JOSK-Iの無刺激状態でのIL-1産生は、飽和細胞濃度で最高となり、かつ細胞濃度依存性であった。培養上清の液体クロマト法での精製、分析の結果、活性部分の分子量は14-30kd、等電点は6.9であった。この活性は抗IL-1抗体にて中和された。またJOSK-I細胞で、IL-1βの遺伝子発現が確認された。2.JOSK-I細胞の増殖におけるIL-1の役割と単球性白血病の病態生理に関する検討:精製IL-1は、液体及び半固形培地におけるJOSK-Iの増殖を濃度依存性に促進し、この細胞に対し、自己増殖促進因子としての作用を示した。白血病症例での検討から、単球性白血病症例で、有意にIL-1産生が高まっていることが確認された。またIL-1産生高値例で、擬固系検査値の異常、特にAPTTの延長を、きたしているものが多くみられた。3.合成IL-1ペプチドの生理活性の検討:ヒトIL-1β前駆体アミノ酸配列中163から171番目のアミノ酸からなるペプチドを合成した。そのIL-1活性は、JOSK-I由来精製IL-1、rhIL-1βの作用に匹敵するものであった。4.JOSK-I由来IL-1の阻害因子の部分精製:IL-1精製過程で、IL-1阻害活性を発見し、部分精製を行った。分子量38kd、等電点5.5で、熱、凍結、融解に対して安定、酸に不安定な物質で、JOSK-I細胞自身の増殖のみならず、活性化されたリンパ球の増殖も抑制した。〔考察〕JOSK-Iの産生するIL-1が、自己増殖促進因子としての機能を持つことは、癌細胞の増殖機構を解明する上で重要であると同時に、近年注目されているIL-1の抗腫瘍活性について慎重に検討を加える必要性を示唆した。また。IL-1には多様な機能があり、合成IL-1ペプチドによる生理活性の検討は、臨床応用を考える上で是非とも必要である。今回同定したIL-1活性抑制物質が、JOSK-Iに対して増殖抑制因子として働くことが推定され、白血病細胞増殖に対する作用を詳細に検索中である。

1. JOSK-I细胞产生的IL-1的纯化：单核细胞系JOSK-I在未刺激状态下的IL-1产生在饱和细胞浓度下达到最大值并且是细胞浓度依赖性的。使用液相色谱纯化和分析培养物上清液表明活性部分的分子量为14-30kd，等电点为6.9。该活性被抗IL-1抗体中和。此外，在JOSK-I细胞中证实了IL-1β的基因表达。 2、IL-1在JOSK-I细胞增殖及单核细胞白血病病理生理中的作用研究：纯化的IL-1在液体和半固体培养基中以浓度依赖性方式促进JOSK-I的增殖，显示出作为这些细胞的自我增殖因子。对白血病病例的研究证实，单核细胞白血病病例中IL-1的产生显着增加。此外，许多IL-1高产生病例的假固体检测值异常，尤其是APTT延长。 3.合成IL-1肽的生理活性的检查：合成由人IL-1β前体氨基酸序列中的氨基酸163至171组成的肽。其 IL-1 活性与 JOSK-I 衍生的纯化 IL-1 和 rhIL-1β 相当。 4.源自JOSK-I的IL-1抑制剂的部分纯化：在IL-1纯化过程中，发现了IL-1抑制活性并进行了部分纯化。分子量38kd，等电点5.5，对热、冻融稳定，对酸不稳定，不仅能抑制JOSK-I细胞本身的增殖，还能抑制活化淋巴细胞的增殖。 [讨论] JOSK-I 产生的 IL-1 作为自我增殖因子对于阐明癌细胞的增殖机制非常重要，这项研究表明需要仔细考虑的抗肿瘤活性。还。 IL-1具有多种功能，在考虑临床应用时，研究合成IL-1肽的生理活性是绝对必要的。此次鉴定出的抑制IL-1活性的物质被推测为JOSK-I的生长抑制剂，目前正在详细研究其对白血病细胞增殖的作用。