Rho/Ca^<2+>経路を介したアクチン再構築とシナプス可塑性

通过 Rho/Ca^<2+> 途径进行肌动蛋白重塑和突触可塑性

• 批准号: 10156220
• 负责人: 尾藤 晴彦
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10156220/
• 关键词: Rho; P160 Rock; Citorn; NMDA受容体; シナプス

(1) Rho標的蛋白質p160ROCKの神経様細胞における作用点と作用機構の解明低分子量G蛋白質Rhoおよびその下流の標的キナーゼp160ROCKは、神経回路網形成・維持に必須な役割を担うと考えられている。そこで本研究計画では、NIE-115細胞でLPA依存性の神経突起退縮反応にp160ROCKが関与している可能性を検討した。p160ROCK阻害剤Y-27632は、用量依存的にN1E-115細胞の突起退縮を完全に抑制することを見出した。また、p160ROCKのドミナント・アクチブ体で突起退縮が刺激非依存性に起こること、p160ROCKのドミナシト・ネガチブ体によって突起退縮が抑制され、逆に突起進展がおこること、などからp160ROCK活性化が突起形成制御に必須の役割を持つことを発見した。(2) グルタミン酸性シナプスにおけるRho標的蛋白CitronとPSD-95の結合の発見我々はRho標的分子Citron(正確には、キナーゼを含まない神経型Citron-N)がそのC末端に典型的なPDZ結合配列を有するPSD蛋白であること、またその免疫原性が初代培養神経細胞にて一部樹状突起スパインと一致すること、等に注目し、CitronとシナプスPSD分画の蛋白、例えばPSD-95と複合体をつくるか検討した。この結果、Citronは多くのグルタミン酸性シナプスにてPSD-95と結合し、NMDA受容体と同一の蛋白複合体に属しうる事が明らかになった。さらに、Citronが、視床や大脳皮質の神経細胞に多く認められ、海馬錐体細胞には発現していないが、海馬のGABA性抑制性介在神経細胞上に存在するグルタミン酸性シナプスに強く発現していることが判明した。

(1) 阐明Rho靶蛋白p160ROCK在神经元细胞中的作用点和作用机制低分子量G蛋白Rho及其下游靶激酶p160ROCK被认为在神经网络的形成和维持中发挥着重要作用.因此，在本研究项目中，我们研究了 p160ROCK 参与 NIE-115 细胞中 LPA 依赖性神经突回缩反应的可能性。我们发现 p160ROCK 抑制剂 Y-27632 以剂量依赖性方式完全抑制 N1E-115 细胞的过程退化。此外，p160ROCK 激活控制突出形成，因为 p160ROCK 的主导活性体以刺激无关的方式引起突出收缩，并且 p160ROCK 的主导/负性主体抑制突出收缩，相反，导致突出进展。一个重要的角色。 (2)发现 Rho 靶蛋白 Citron 与谷氨酸能突触中的 PSD-95 结合。 Citron 和突触 PSD 组分蛋白（例如 PSD-95）重点关注以下事实：它是具有序列的 PSD 蛋白，并且其免疫原性部分对应于原代培养神经元中的树突棘的免疫原性。结果显示，Citron 在许多谷氨酸能突触处与 PSD-95 结合，可能与 NMDA 受体属于同一蛋白质复合物。另外，可知Citron在丘脑和大脑皮层的神经元中大量表达，在海马锥体神经元中不表达，但在海马的GABA能抑制性中间神经元的谷氨酸能突触中强烈表达。

项目成果

Furuyashiki, T.: "Citron, a Rho-target, interacts with PSD-95/SAP-90 at glutamatergic synapses in the thalamous." J.Neurosci.19. 109-118 (1999)

Furuyashiki, T.：“Citron 是一种 Rho 靶点，与丘脑谷氨酸能突触处的 PSD-95/SAP-90 相互作用。”