血管平滑筋細胞の分化・増殖に対するプロテアソームの制御機構について

蛋白酶体对血管平滑肌细胞分化和增殖的控制机制

基本信息

批准号：
08672543
负责人：
高岡昌徳
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Osaka University of Pharmaceutical Sciences
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08672543/
关键词：
プロテアソーム血管平滑筋細胞細胞増殖細胞分化細胞周期

项目摘要

プロテアソームは、分子内に数種の触媒活性を有する細胞内多機能プロテアーゼ複合体である。最近、本酵素が細胞の分化や増殖に関連した短寿命タンパク質を分解することが相次いで報告され、細胞の分化・増殖に重要な役割を果たす分子として注目されている。本研究では、初代培養ラット血管平滑筋細胞の収縮型から合成型への形質転換ならびに増殖におけるプロテアソームの役割について検討した。酵素分散法により単離した血管平滑筋細胞をウシ胎仔血清を用いて培養すると細胞の増殖に伴い、収縮型血管平滑筋細胞に豊富に存在する平滑筋型αアクチンが顕著に減少し、形質転換が確認された。同時に、プロテアソーム含量及び比活性値は有意に増加した。次いで、プロテアソーム阻害薬であるcarbobenzoxy-L-isoleucyl-γ-t-butyl-L-glutamyl-L-alany1-L-leucinal(PSI)存在下で培養すると形質転換、増殖ともに抑制され、増殖抑制は細胞周期のG0/G1期およびG2/M期からの進行阻害によることが明らかとなった。血清飢餓培養により静止期に同調した血管平滑筋細胞を血小板由来増殖因子(PDGF)で刺激すると形質転換が起こったが、これはPSIをPDGF刺激の1時間前に添加しておくことにより抑制された。しかし、PDGF刺激3時間後にPSIを添加しても抑制はみられなかった。以上、初代培養ラット血管平滑筋細胞では形質転換に伴いユビキチン・プロテアソーム依存性タンパク質分解システムが亢進し、細胞周期関連タンパク質の分解を介してG0/G1期ならびにG2/M期からの進行を制御している可能性がある。また、プロテアソームは増殖刺激後の比較的短時間に起こる形質転換の決定にも、重要な制御調節因子として機能していることが示唆された。

蛋白酶体是一种细胞内多功能蛋白酶复合物，具有分子中的几种催化活性。最近，据报道，这种酶会降解与细胞分化和增殖有关的短寿命蛋白，并吸引了作为一种在细胞分化和增殖中起重要作用的分子的注意。在这项研究中，我们研究了蛋白酶体在原代培养的大鼠血管平滑肌细胞从收缩到合成形式的转化和增殖中的作用。当使用胎儿牛血清培养通过酶分散分离的血管平滑肌细胞时，在收缩的血管平滑肌细胞中丰富的平滑肌α-肌动蛋白被显着降低，从而确认转化。同时，蛋白酶体含量和特定活性值显着增加。 Next, when cultured in the presence of a proteasome inhibitor carbobenzoxy-L-isoleucyl-γ-t-butyl-L-glutamyl-L-alany1-L-leucinal (PSI), both transformation and proliferation were suppressed, and it was revealed that the inhibition of growth was caused by inhibition of progression from the G0/G1 and G2/M phases of the cell cycle.当刺激血小板衍生的生长因子（PDGF）通过血清饥饿培养在静态期同步的血管平滑肌细胞时发生转化，血清饥饿培养物在PDGF刺激前1小时添加PSI抑制。但是，当PDGF刺激后3小时添加PSI时，未观察到抑制作用。在原代培养的大鼠血管平滑肌细胞中，泛素 - 蛋白酶体依赖性蛋白水解系统通过转化增强，并且有可能通过降解与细胞周期相关蛋白的降解从G0/G1和G2/M相从G0/G1和G2/M相。还提出，蛋白酶体在确定增殖刺激后相对短暂发生的转化时也起着重要的调节剂的作用。