意識下動物における脳の微細血管の直視下連続的観察法の開発

清醒动物脑微血管连续直接观察方法的建立

基本信息

批准号：
08558086
负责人：
堀田晴美
金额：
$ 5.95万
依托单位：
Tokyo Metropolitan Institute of Gerontology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至 1997
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、細動脈から毛細血管まで大脳皮質や海馬などの脳内の種々の部位の微細血管を連続的かつ定量的に観察する方法を開発することを目的とする。本年度は、意識下動物を用いて、最近開発されたデジタルマイクロスコープを用いて、大脳皮質表面の微細血管を連続的に観察する方法を開発し、種々の生理的刺激を加えた際の、大脳皮質表層血管径の変化を観察し、本方法の生理実験への有効性を明らかにした。1.麻酔下でWistar系ラットの側頭部頭蓋骨に両側性に外径6mmのステンレス製パイプを歯科用セメントで装着した。装着したパイプを用いて脳定位固定装置にラットを固定し、頭蓋骨に4x9mmの穴を開け硬膜を切除し、脳表血管を観察するための窓を開けた。ラットの頭部をパイプで脳定位固定装置に、胴体をサポーターで実験台に安定に固定した。脳の表面の血管にデジタルマイクロスコープの焦点を合わせ、連続的にビデオテープに記録した。ラットの麻酔がさめたのちにデジタルマイクロスコープの倍率1000倍で、直径5-36μmの血管径の変化を連続的に観察することができた。2 脳血管を拡張させることが知られている6%の炭酸ガス吸入刺激1分間を行うと、直径14-27μmの血管の直径はいずれも刺激後30秒で約130-140%に増大した。次に生理的な刺激として、ラットの後肢に1Hzでブラシでこする刺激を2分間加えた。その結果、刺激後1分後に、直径5μmの血管は約130%に、直径15μmの血管は約110%に、直径36μmの血管は約106%に、それぞれ直径が増大した。以上の結果から、デジタルマイクロスコープを用いることにより、意識下動物の脳表面の血管の変化を連続的に観察し、種々の刺激に対する反応を研究することに対応できることが明らかとなった。

这项研究旨在开发一种方法，用于对大脑各个部位的微血管血管的连续和定量观察，例如大脑皮层和海马，从小动脉到毛细血管。今年，我们开发了一种使用潜意识动物的数字显微镜在脑皮质表面连续观察微血管血管的方法，并在应用各种生理刺激时观察到脑皮质血管直径的变化，从而揭示了这种生理学实验方法的有效性。 1。在麻醉下，将外径为6 mm的不锈钢管双侧连接到带牙水泥的Wistar大鼠的颞头骨上。使用附着的管子将大鼠固定在立体定向装置上，在头骨中制成4x9mm的孔，然后去除硬脑膜，并打开窗户以观察大脑的表面血管。大鼠的头稳定地固定在立体定向装置上，使用管道稳定地固定在实验表上。数字显微镜专注于脑表面上的血管，并连续记录在录像带上。麻醉大鼠后，在数字显微镜为1000倍的放大倍率下连续观察到血管直径为5-36μm。 2当1分钟的二氧化碳吸入刺激为6％（已知会扩张大脑血管）时，刺激后直径为14-27μm的血管的直径增加到约130-140％30秒。然后，用刷子摩擦刺激在1 Hz的情况下将生理刺激应用于大鼠的后腿2分钟。结果，刺激后一分钟，直径5μm的血管的直径增加到约130％，直径为15μm至直径的血管的直径增加到约110％，而36μm直径的血管的直径增加到约106％。从上述结果中可以揭示出使用数字显微镜可以不断观察到潜意识动物脑表面上的血管变化，并研究对各种刺激的反应。