知覚神経節での活性物質遺伝子発現操作と末梢神経傷害に伴う情報伝達異常

感觉神经节活性物质基因表达的调控以及与周围神经损伤相关的异常信息传递

基本信息

批准号：
07858087
负责人：
三木健司
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Hyogo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

最近我々は、後根神経節の大型細胞のサブスタンスP(SP)、CGRP(カルシトニン遺伝子関連ペプチド)の発現が誘導され、中枢側の終末部位の一である後索核で増加し、その結果中枢神経系に影響を与える可能性を示した。そこでCGRP、SP、ニューロペプチド(NPY)など末梢神経障害後発現が誘導される活性物質の発現を抑制して、その生体における反応を検索し、神経ペプチドの発現誘導の意義を探る事が研究の目的である。方法 1、アンチセンスオリゴヌクレオチド法によって、末梢神経障害後の知覚神経節において新たに発現が誘導される遺伝子を、mRNAレベルで抑制する為の基礎実験を施行した。ラットの一側に坐骨神経を切断し、同日よりL4-5椎体レベルにカテーテルを挿入し、intrathecalにinfusion pumpでアンチセンスオリゴヌクレオチドを連続的に投与した。プローブとしてOGRP mRNAに相補助な配列を用いた。発現の抑制はin situハイブリダイゼーション法を用いて確認した。また、翻訳後の蛋白レベルの確認には特異的抗体を用いた免疫組織化学法を使用した。 2、末梢神経痛モデル動物でのアンチセンスオリゴヌクレオチドによるmRNA発現抑制を行う為にモデル動物を作成し、その痛覚関連行動の測定と神経活性物質の発現を検索した。結果アンチセンスオリゴヌクレオチドの投与方法や最適濃度についての最適条件を見つけるために実験を繰り返した結果、一部の動物において末梢神経傷害後の知覚神経節において新たに発現が誘導される遺伝子産物が、減少した。しかし、センスプ-ブやミスセンスプローブを用いての特異性の検討などの問題が残っている。

近年来，我们诱导了后神经节中大尺度细胞的P（SP）和CGRP（降钙素基因相关肽）的表达，随着中心末端之一的增加，这是一个末端 - 的末端之一。生命部分，结果表明了影响神经系统的可能性。因此，研究是抑制外周神经植物（例如CGRP，SP，Neuropeptide（NPY）），在活体中寻找反应的活性物质的表达，并探索神经肽的诱导意义目的。方法1，一种反义寡核苷酸方法已实施了基本实验，以抑制在mRNA水平的周围神经神经神经植物节点中的mRNA水平的新诱导基因。坐骨神经在大鼠的一侧断开，从同一天开始将导管插入L4-5椎骨水平，并连续将抗沉思寡核苷酸和输注泵连续给胸膜内给药。作为探针，使用相位辅助阵列用于OGRP mRNA。使用原位杂交方法证实了表达的抑制。为了确认翻译后的蛋白质水平，使用了使用特定抗体的免疫组织定律。 2。创建了一个外周神经疼痛模型，以通过抗稳态寡核苷酸抑制mRNA表达，并寻找测量疼痛相关行为的测量和神经活性物质的表达。结果，由于反复的实验发现了抗强度寡核苷酸的最佳条件和最佳浓度，因此某些动物在周围神经神经系统损害后在周围神经系统疾病淋巴结中有新诱导的表达，它已经减少了。但是，存在一些问题，例如使用Seensup和Misty Sense探针检查特异性。