肝癌に対するSeM/METシステムによる新しい遺伝子治療の開発

利用 SeM/MET 系统开发肝癌新基因疗法

基本信息

批准号：
13218039
负责人：
三木健司
金额：
$ 4.16万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

我々は、Pseudomomas putidaより、cloningした、methionine-γ-lyase (MET)を、組換えadenovirus vectorに組み込み(Ad-MET)、メチオニンの誘導体であるセレノメチオニン(SeM)の存在下に非常に強い抗癌作用を発揮することを発見した。本研究では、MET/SeMシステムの殺細胞効果のメカニズムの解明と肝癌細胞株を移植したnude mouseを用いてin vivoでの治療効果を検討した。SeMは、MET遺伝子により分解されて、methylselenolを産生する。Methylselenolは、GSHの組織内酸素による酸化作用を触媒すると考えられる。Ad-MET感染細胞はSeM存在下にsuperoxideを産生し、組織内GSHの著明な低下することが確認された。この反応で産生された活性酸素はミトコンドリアを傷害し、menbrane potentialが低下し、ミトコンドリア内のcytochrome cの細胞質内への放出が始まる。これがトリガーとなり、caspase 9、caspase 3を活性化しapoptosisを起こすことが判明した。通常、SeMのIC50は、100〜1000μMであるが、AdMET感染細胞では0.3〜5μMまで低下した。また、AdMET感染細胞と非感染細胞の共培養の実験より、わずか3%のAdMET感染細胞により80%以上の細胞が死滅した。肝癌細胞株N1S1腹膜播種モデルにおいて、コントロールウイルス投与群あるいは、SeM非投与群がすべて3週間以内に死亡したのに比べて、Ad-MET/SeM腹腔内投与群では60%のマウスが8週間以上生存した。

我々は、假性瘤putida より、克隆した、蛋氨酸 - γ-乙烯酶（Met）を、组换え腺病毒载体に组み込み（AD-MET）、メチオニンの诱导体であるセレノメチオニン（SEM）の存在下に非常に强い抗（SEM）の存在下に非常に强い抗（SEM）の存在下に非常に强い抗发现以证明癌症的作用。在这项研究中，我们研究了使用裸鼠的裸鼠，体内的MET/SEM系统的细胞效应作用的机理，该效应已移植了肝癌细胞储备。 SEM被MET基因分解以产生甲基塞烯醇。甲基塞烯醇被认为是催化组织中GSH的氧化作用。已经证实，AD-MET感染的细胞在SEM中产生超氧化物，并且组织中的GSH显着降低。在此反应中产生的活性氧会损害线粒体，降低造成蒙脑电位，并开始释放细胞色素c进入线粒体的细胞源细胞。这成为触发，振兴的caspase 9和caspase 3，并引起凋亡。通常，SEM IC50为100至1000μm，但对于受病态感染的细胞降低至0.3至5μm。此外，只有3％的ADMET感染细胞杀死了80％以上的细胞中的CO文化实验和非感染细胞之间的细胞。与对照病毒给药组相比，在肝癌细胞库存N1S1腹膜播种模型中，在AD-MET/S-SEM腹腔给药组中，60％的小鼠为60％或以上。我幸存下来。