ミエリン脂質ガラクトセレブロシドの合成・分解酵素の発現に関する研究

髓磷脂脂质半乳脑苷脂合成及降解酶表达的研究

基本信息

批准号：
07770572
负责人：
谷池雅子
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ミエリンに特異的な脂質であるガラクトセレブロシドの合成酵素であるUDP-galactose:ceramide galactosyltransferase(CGT)とその分解酵素であるgalactocerebrosidase(GALC)の発現をマウス(C57BL/6J)脳にて日令別に調べ、ミエリン形成と関係を検討した。【結果】(1)northern blot hybridizationではCGT mRNAの発現は日令10より認められ、ミエリン形成が盛んになる日令25においてピークが認められ、その後ゆるやかに減少した。GALCはCGTに比べて、mRNAの発現量が少なく、また、日令30を過ぎて発現量が増加するパターンが認められた。(2)リボプローブを用いたin situ hybridizationでは傍正中矢状断においてCGTは日令5日にて既に脳梁を始めとする大脳にmRNAの発現が認められ、日令20には大脳・小脳白質に限局したmRANが明瞭となったが、adultではむしろ減弱した。GALCは日令20にて脳内に明瞭なmRNAのシグナルは認められなかったが、adultではCGT同様に白質に限局したシグナルが認められた。GALCを強発現している細胞はオリゴデンドロサイトと思われた。【考察】GALC遺伝子はそのプロモーター領域の解析または神経外臓器の発現パターンにおいてはhouse-keeping geneの性格を示すが、脳内においては白質(オリゴデンドロサイト)に特異的に発現するパターンを示した。また、発現のピークはCGTにおいてはミエリン形成の盛んな時期と一致していたのに対して、GALCではそれよりも遅れ、GALCがミエリン形成というよりもその維持にかかわっている可能性が示唆された。

研究了不同年龄的小鼠（C57BL/6J）脑中UDP-半乳糖：神经酰胺半乳糖基转移酶（CGT）（一种髓磷脂特异性脂质半乳糖脑苷脂的合成酶）和半乳糖脑苷脂酶（GALC）（其降解酶）的表达。，研究了其与髓磷脂形成的关系。 [结果]（1）Northern blot杂交中，CGT mRNA表达从第10天开始观察，在第25天髓磷脂形成活跃时达到高峰，然后逐渐下降。 GALC的mRNA表达水平比CGT低，并且观察到30岁以后表达水平增加的模式。 (2)核糖核酸探针原位杂交显示，5日龄时，CGT mRNA已在大脑中表达，包括胼胝体，20日龄时，大脑和小脑中的mRAN定位于白质变得清晰。，但在成人中则相当减弱。在 GALC 中，20 岁时在大脑中没有观察到清晰的 mRNA 信号，但在成年人中，与 CGT 类似，观察到了定位于白质的信号。强烈表达 GALC 的细胞似乎是少突胶质细胞。 [讨论] GALC基因的启动子区域及其在神经外器官中的表达模式的分析显示出看家基因的特征，但在大脑中它显示出白质（少突胶质细胞）特有的表达模式。此外，CGT 的峰值表达与髓磷脂形成活跃期一致，而 GALC 的表达延迟，表明 GALC 可能参与髓磷脂形成的维持而不是 Ta 的形成。