膜結合型細胞増殖因子によるジャクスタクラインとそれに関与する膜蛋白質の解析

膜结合细胞生长因子及其参与的膜蛋白分析近分泌

基本信息

批准号：
07780636
负责人：
岩本亮
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Kurume University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07780636/
关键词：
ジャクスタクライン膜結合型増殖因子 HB-EGF CD9 Integrinα3β1

项目摘要

(1)proHB-EGFのジャクスタクライン活性の解析HB-EGFは膜結合型でジャクスタクライン細胞増殖活性を有することが明らかとなった。(2)CD9との複合体形成によるproHB-EGFのジャクスタクライン活性上昇proHB-EGF発現細胞にさらにCD9を導入し、proHB-EGFのみ発現する細胞とのジャクスタクライン細胞増殖活性の比較を行ったところ、CD9を発現している方が数十倍の活性の高さを示したことから、proHB-EGFは細胞表面でCD9と複合体を形成することによって膜結合型増殖因子として活性化されることが分かった。(3)proHB-EGF:CD9複合体とIntegrinα3β1とのアソシエーション表層ラベルしたVero細胞のライセ-トを抗CD9抗体で免疫沈降を行い共沈物を解析したところ、接着分子のIntegrinα3β1であることが明らかとなった。さらに同様のことをproHB-EGF高発現Vero細胞(Vero-H細胞)を用いて行ったところ、CD9を介してproHB-EGF、Integrinα3β1の三者が複合体を形成していることが明らかとなった。(4)proHB-EGF:CD9:Integrinα3β1複合体の細胞間接着部位における局在CD9、proHB-EGF、Integrinα3β1の三者それぞれのVero-H細胞における局在を、それぞれに対する抗体を用いて蛍光抗体を行い、共焦点レーザー顕微鏡で観察したところ、これら三者はいずれも細胞間接着部位にほぼ重なって局在することが分かった。これらのことから、proHB-EGFが膜結合型増殖因子としてジャクスタクラインにおいて機能するために、その活性を制御する膜蛋白質CD9、細胞接着分子Integrinα3β1の三者が複合体を形成し、細胞間接着部位において協調的に働いていることが示唆された。

（1）分析ProHB-EGF的Jacksta Cline活性，已经表明HB-EGF具有结合膜的类型，并且具有Jacksta Cline细胞的增殖活性。（2）由于与CD9的复杂形成，ProHB-EGF的凹qual活性增加了。当将CD9进一步引入表达ProHB-EGF的细胞中时，我们将跌ackqualine细胞增殖活性与单独表达ProHB-EGF的细胞进行了比较，发现ProHB-EGF被激活为膜结合的生长因子，通过在细胞表面上与CD9形成复合物。（3）PROHB-EGF的关联：CD9复合物和整联链α3β1当用抗CD9抗体和分析共沉淀的表面标记的Vero细胞的许可时，据显示，这是粘附分子整合蛋白α3β1。此外，使用具有高表达ProHB-EGF表达的Vero细胞（VERO-H细胞）进行，并揭示了三个方ProHB-EGF和Integinα3β1通过CD9形成复合物。（4）在ProHB-EGF：CD9：整合性α3β1复合物中的细胞间粘附位点的定位。三个Vero-H细胞的定位，CD9，ProHB-EGF和整合素α3β1，是使用荧光抗体对两个的荧光抗体进行的，并使用两个共核激光显微镜和越过这些三个杂物，并观察到了这三个杂物，并观察到这三个杂物及其越过这些三个杂物。细胞间粘附部位。这些结果表明，proHB-EGF在juxtachline中起着膜结合的生长因子的作用，而调节其活性的三方膜蛋白CD9和细胞粘附分子整合性α3β1形成复杂性，并在细胞间粘附部位进行协作。