薬物分子の「柔構造」と動的構造の解析に基づく医薬品の分子設計

基于药物分子“灵活”和动态结构分析的药物分子设计

基本信息

批准号：
07772219
负责人：
後藤了
金额：
$ 0.64万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07772219/
关键词：
グルコース輸送担体サイトカラシンブレフェルジン CONFLEX3

项目摘要

文献で報告されたサイトカラシン類による赤血球グルコース輸送担体の阻害濃度と構造解析の結果では、サイトカラシンBおよびAのα,β-不飽和ラクトンとγ位水酸基ないしケト基によって決定づけられる14員環構造のコンフォメーションをMM計算およびH-NMR測定とで確認し、その立体構造と活性との比較から活性コンフォマ-を明らかにした。そこでさらにサイトカラシンとの構造類似性が高いと考えられるブレフェルジンAとその誘導体の立体構造の解析を行い、生理活性の予測を行った。この標的タンパク質となる赤血球バンド4.5(グルコース輸送担体)は膜貫通型で、膜表面側のグルコース認識部位がトリプシンによる切断を受けることが知られている。そこでTPCK処理トリプシンの活性に対するグルコースの阻害を測定した。赤血球膜を強アルカリ(NaOH)抽出またはカオトロピックイオン(KI)抽出法によって膜内在性タンパク質の分離を行ったところ分子量93kDa(バンド3、アニオン輸送担体),60kDa(バンド4.5)の2つのタンパク質を単離した。バンド3はモノクローナル抗体を用いた解析の結果、TPCK処理トリプシンによって52.42.19kDaの3種類の膜中フラグメントになることを明らかにし、これ以外の38.33.26kDaの3つのバンドがバンド4.5に由来するフラグメントである可能性を見いだした。そこで、この系を用いてグルコース輸送担体に結合する化合物を加えたところバンド4.5の断片フラグメントの生成が抑制されたが、バンド3由来のフラグメント生成と比較したところ定量的に一致する結果が得られないことがわかった。そこで現在、TPCK処理トリプシンの活性に対するグルコースおよびその構造類似化合物による抑制作用を検討中であり、この問題を解決した後サイトカラシンとブレフェルジンとの基本骨格の相違による生理活性の相違を測定する。

文献报道的细胞松弛素对红细胞葡萄糖转运载体的抑制浓度和结构分析结果表明，细胞松弛素B和A具有由α,β-不饱和内酯和羟基或酮基决定的14元环结构。通过MM计算和H-NMR测量确认了化合物的γ位构象，并通过比较其三维结构和活性明确了活性构象异构体。因此，我们进一步分析了与细胞松弛素具有高度结构相似性的布雷菲德菌素A及其衍生物的三维结构，并预测了它们的生理活性。已知目标蛋白红细胞带4.5（葡萄糖转运载体）为跨膜型，膜表面的葡萄糖识别位点被胰蛋白酶切割。因此，我们测量了葡萄糖对 TPCK 处理的胰蛋白酶活性的抑制作用。当我们通过强碱 (NaOH) 提取或离液离子 (KI) 提取将整合膜蛋白与红细胞膜分离时，我们发现了两种分子量分别为 93 kDa（条带 3，阴离子转运蛋白）和 60 kDa（条带 4.5）的蛋白质。我放手了。使用单克隆抗体进行分析的结果表明，通过用TPCK进行胰蛋白酶处理，条带3被转化为三种类型的52.42.19kDa的膜片段，而另外的三个38.33.26kDa的条带是来自条带4.5的片段。我们发现了这样的可能性因此，当我们使用该系统添加与葡萄糖转运载体结合的化合物时，带4.5片段的产生受到抑制，但与来自带3的片段产生相比，我发现获得了定量一致的结果。没有。因此，我们目前正在研究葡萄糖及其结构相似的化合物对TPCK处理的胰蛋白酶活性的抑制作用，在解决这个问题后，我们将测量细胞松弛素和布雷菲德素由于其碱性的不同而产生的生理活性差异。骷髅。

项目成果

期刊论文数量（1）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Eiji Majima,Satoru Goro,Hiroshi Hori,Yasuo Shinohara,Yearg Man Houg: "Stabilities of the Fluorascent SH-Reazenc Eosin-5-makimide and Its Adducts with Sulfaydryl Compounds" Biochimica et Biophysica Acta. 1243. 336-342 (1995)

Eiji Majima、Satoru Goro、Hiroshi Hori、Yasuo Shinohara、Yearg Man Houg：“荧光 SH-Reazenc Eosin-5-makimide 及其与 Sulfaydryl 化合物的加合物的稳定性”Biochimica et Biophysicala Acta。