外因性誘導による高血圧トランスジェニックマウス系統の確立

外源性高血压转基因小鼠系的建立

基本信息

批准号：
06780698
负责人：
杉山文博
金额：
$ 0.77万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

外因性誘導による高血圧トランスジェニック(Tg)マウスを作成するため、重金属負荷に対しプロモーター活性を増強することが知られているマウス・メタロチオネイン(MT)遺伝子プロモーター領域とマウスアンギオテンシノーゲン(AG)遺伝子構造領域を融合したMT/AG遺伝子を構築し、導入遺伝子とした。培養細胞にてMT/AG融合遺伝子が発現能力を有することを確認後、マウス受精卵への導入を行った。得られた44匹の産仔のうち、1匹がTgマウスと同定され、これより子孫を作出した。Tgマウスにおける導入遺伝子の発現は、肝臓を主に、脳、心臓で観察された。血漿中AG量は野生型マウスの約3倍であった。また、収縮期血圧の上昇は観察されなかった。一方、重金属負荷を行ったTgマウスにおいては、未負荷のTg個体と比較して血漿中のAG量およびアンギオテンシンI量の上昇が見られなかったにも関わらず、10-20mmHgの血圧上昇を呈した。この血圧上昇はアンギオテンシン変換酵素阻害薬であるカプトプリル投与により抑えられたため、レニン・アンギオテンシン(RA)系の活性化によるものと推察された。また、各臓器における導入遺伝子の発現を未負荷のTgマウスと比較すると、肝臓において僅かな増加にも関わらず、脳、心臓、小腸において顕著な発現増強が確認された。これらのことから、本Tgマウスにおける血圧上昇は循環中とは独立に存在する組織RA系の亢進が引き起こしている可能性が推察された。現在、本マウスと最近作成したAG遺伝子欠損マウスとの交配により、マウス個体内において内在性AGが欠損その代用としてMT/AG融合遺伝子が発現する新たなマウスを作出し、組織RA系と血圧との関係をより詳しい解析中である。

为了创建外源诱导的高血压转基因（Tg）小鼠，我们研究了小鼠金属硫蛋白（MT）基因启动子区域和小鼠血管紧张素原（AG）基因结构，已知该结构可增强MT/AG基因响应的启动子活性。构建具有融合区域的并用作转基因。确认MT/AG融合基因具有在培养细胞中表达的能力后，将其导入小鼠受精卵中。在获得的 44 窝小鼠中，其中一窝被鉴定为 Tg 小鼠，并从中产生了后代。 Tg 小鼠中转基因的表达主要在肝脏、大脑和心脏中观察到。血浆AG含量约为野生型小鼠的三倍。此外，没有观察到收缩压升高。另一方面，负载重金属的 Tg 小鼠血压升高 10-20 mmHg，但与未负载重金属的 Tg 小鼠相比，血浆 AG 和血管紧张素 I 水平没有增加。服用卡托普利（一种血管紧张素转换酶抑制剂）可抑制血压升高，因此推测这是由于肾素-血管紧张素（RA）系统的激活所致。此外，当将各器官中转基因的表达与未负载的Tg小鼠进行比较时，尽管肝脏中略有增加，但在脑、心脏和小肠中证实了显着的表达增强。这些结果表明，该Tg小鼠的血压升高可能是由于独立于循环而存在的组织RA系统的增强引起的。目前，通过将该小鼠与最近创建的 AG 基因缺陷小鼠杂交，我们创建了一种新小鼠，其中表达 MT/AG 融合基因作为个体小鼠中缺乏内源性 AG 的替代品，并且组织 RA我们目前正在更详细地分析这种关系。