小児の齲蝕感受性と獲得被膜構成タンパク質の特性に関する研究

儿童龋齿易感性及获得性荚膜蛋白特性研究

• 批准号: 06772048
• 负责人: 高橋 智秀
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Tsurumi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06772048/
• 关键词: 酸処理エナメル質; 獲得被膜; アミノ酸分析

歯磨剤による清掃直後、または修復処置に伴なう酸処理直後の歯表面には、唾液中のタンパク質が特異的に吸着して獲得被膜が形成される。これらの唾液タンパク質にはいくつかの種類があり、歯面との吸着状態に強度の差があることをこれまでの研究で示してきた。現在小児の獲得被膜の個体差や、齲蝕感受性との関連についての研究を計画している。しかし、大人であっても形成された時間が分っている獲得被膜だけを、分析可能な量だけ1口腔から採取したり、直接ヒトの口腔内から唾液や血液を混入させずに採取することは非常に困難である。今回の研究では、複数の被検者について、各被験者から計測可能な量の被膜を効率良く実験的に形成・採取する方法を考案した。被験者は歯磨剤を用いずに歯磨きし、超純水で洗口後、吸引装置で舌下から貯留唾液を30ml採取した。唾液採取には30〜150分を要した。細菌や食物を除去するために、唾液は15,000rpmで10分間の遠心分離を行ない、上清のみを使用した。一方、同一規格(10×6×2mm)で作製したウシエナメル質ブロックの表面を30秒間酸処理し、ディスポ-ザブルの蓋付きプラスチックシャーレに20個接着し、これに上清を加え、発砲スチロールの氷上に置き、2時間振盪して被膜を形成した。2時間後にエナメル表面質を充分水洗・乾燥し、被膜をスケーラーで掻き取って採取した。これを6規定塩酸で24時間(110℃)加水分解した後、日立L-8500型高速アミノ酸分析装置で分析した。その結果、6人の個々の被検者の唾液について20歯面から採取し計測できた被膜試料は約7,000〜9,000ngであり、この方法によって充分計測可能な量の被膜を採取できることが分った。またこれらの採取被膜試料は、グリシン、グルタミン酸、プロリンの多い高プロリンタンパク質であることが確認され、これまでの研究結果とも一致している。

用牙医或与修复处理相关的酸处理后立即在牙齿表面上，唾液中的蛋白质被特异性吸附并形成所获得的膜。这些唾液蛋白有几种类型，并且表明与牙齿表面吸附的强度有所差异。目前，我们正在计划有关获得儿童的个体差异以及与龋齿敏感性有关的研究。但是，即使对于成年人，只能以一个口腔量的量收集的摄入膜，或者直接从人类的口腔中收集，而无需混合唾液和血液。在这项研究中，我们设计了一种有效和实验形成的方法，并收集了可以从每个受试者中测量的多个受试者的测量量。受试者用超纯水洗涤口腔后，不使用牙膏刷牙，并用吸气装置从舌头下方收集30毫升唾液。唾液收集花了30到150分钟。为了去除细菌和食物，以15,000 rpm的速度制成10分钟，仅使用上清液。另一方面，在相同标准（10×6×2 mm）中制备的Ushienamel块的表面酸性30秒，并在带有一次性盖的塑料片上附着20片，海洋为在发射中增加了它。两个小时后，将搪瓷表面质量完全洗涤并干燥，并用缩放器刮掉并收集。 24小时（110°C）用6个指定的盐酸在24小时（110°C）后通过日立L-8500高速氨基酸分析对此进行了分析。结果，可以从20个单个受试者的20个牙齿表面收集并测量的膜样品约为7,000至9,000 ng，并且该方法可以收集足够测量的涂层。已经证实，这些薄膜样品是甘氨酸，谷氨酸和高prinos的高原代蛋白，这与迄今为止研究的结果一致。