獲得被膜の構成タンパク質成分に関する研究

后天被膜蛋白质组成成分的研究

• 批准号: 05771900
• 负责人: 高橋 智秀
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Tsurumi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05771900/
• 关键词: 酸処理エナメル質; 獲得被膜; アミノ酸分析

口腔内に萌出した歯表面に吸着されている獲得被膜は、歯表面の脱灰と再石灰化に関与してるものと考えられている。唾液の組成がある程度変化しても、歯面に吸着された被膜自体のアミノ酸組成はそれ程大きな変化をもたらすものではないようであり、著者自身の口腔内でウシのエナメル質切片に形成した被膜を掻き取って採取した試料でも、既に発表されている被膜の組成と近いものであることは確認された。また、この被膜を形成するタンパク質成分の中から尿素によって抽出される成分と、歯面を脱灰しない程度に希釈した塩酸によって抽出される成分は非常に近似したアミノ酸組成を示すことがわかった。しかし、物理的に採取した被膜のアミノ酸概形と化学的に抽出した被膜成分の概形とが異なるので、化学的な抽出後にも歯表面に強く吸着されている被膜成分が存在すると考え、それらの成分の回収・分析を試みている。回収量の少ない被膜から更に微量の吸着成分を得るには、分析までの中間手順をなるべく少なくしたいと考え、試料回収法の改良を試みている。歯質の脱灰をともなう操作では、溶出したカルシウムを除去する必要が生じ、この操作によって試料はほとんど消失する。尿素によって成分抽出した後の歯表面から掻き取りを行なった場合、歯面を乾燥した時に析出してくる尿素の結晶は、様々な洗浄方法によっても排除することが出来なかった。そこで、尿素の結晶ごと被膜を掻き取って0.1M酢酸に溶解し、遠心分離によって得られた上清から脱塩用カラムで尿素を除去し、得られた画分を凍結乾燥してタンパク質だけ回収することを考えた。現在この手順による試料回収で、アミノ酸分析が可能か否か検討を重ねている。

被认为在口腔中爆发的牙齿表面吸附的涂层被认为与牙齿表面的脱矿化和回忆有关。即使唾液的组成在某种程度上发生变化，在牙齿表面吸附的涂层的氨基酸组成似乎并没有发生重大变化，并且已经确认，通过刮下作者口腔中牛搪瓷部分上形成的涂层收集的样品与以前已出售的涂料相似。还发现，尿素从形成涂层的蛋白质成分中提取的成分和由盐酸提取的成分，这些成分已被稀释至如此程度，以至于牙齿表面不会非常紧密地矿物质化，表现出非常相似的氨基酸成分。但是，由于物理收集的涂层的氨基酸的一般形状与化学萃取的涂层成分的一般形状不同，因此我们认为即使化学萃取后，也有涂层成分在牙齿表面上强烈吸附，我们正在尝试恢复和分析这些成分。为了从具有少量回收率的涂层中获取更多痕量的吸附成分，我们正在尝试改进样本恢复方法，以减少导致分析的中间步骤。在涉及牙齿脱钙的操作中，有必要去除洗脱的钙，并且此过程几乎完全消除了样品。当用尿素提取成分后，从牙齿表面刮擦时，即使通过各种清洁方法，也无法消除牙齿表面干燥时沉淀的尿素晶体。因此，认为将尿素晶体刮掉，溶解在0.1m的乙酸中，并使用脱盐柱从离心获得的上清液中除去尿素，然后将所得的馏分冻干以恢复蛋白质。目前，我们正在不断研究使用此过程通过样品回收来进行氨基酸分析。