細胞増殖シグナルによるグルコ-ストランスポ-タ-動的変化の分子機構

细胞增殖信号诱导葡萄糖转运蛋白动态变化的分子机制

基本信息

批准号：
02152082
负责人：
蛯名洋介
金额：
$ 3.2万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.インスリンレセプタ-チロシンキナ-ゼの細胞内基質の1つはPIー3キナ-ゼである。従来までインスリンレセプタ-チロシンキナ-ゼの基質はいろいろ報告されているが、それらが本当の生理的役割をもつチロシンキナ-ゼの基質であるのかどうか明らかではなかった。昨年、PIタ-ンオ-バ-の中の新しい酵素であるPI3キナ-ゼがインスリンシグナル伝達のメディエ-タ-の1つである可能性が示唆された.そこで高度に精製したPI3キナ-ゼが精製したインスリンレセプタ-によりin vitroの系でインスリン反応性にリン酸化されるかどうかを検討した。その結果、PI3キナ-ゼの85Kサブユニットが、活性化されたインスリンレセプタ-チロシンキナ-ゼによりリン酸化されていることが明らかとなり、このチロシンリン酸化によりPI3キナ-ゼの活性化が起っている可能性が示唆された。in viroおよびin vitroの結果よりPI3キナ-ゼがインスリンレセプタ-チロシンキナ-ゼの生理的な基質の1つであることがほぼまちがいないと思われる.2.グルコ-ストランスポ-タ-タイプI(GLUT1)のエンハンサ-細胞増殖因子により転写促進が起こるマウスグルコ-ストランスポ-タ-(GLUT1)の遺伝子を単離し、その発現調節機構を解析した。その結果2つのエンハンサ-エレメントを見出した。1つは5'端上流3.5kb付近にAP1,SREを含むエンハンサ-エレメントが存在する。また第2イントロン中にもエンハンサ-エレメントが存在することを見出した。現在この2つのエンハンサ-エレメントが細胞増殖因子による転写促進にどのように関与しているか検討中である.

1.胰岛素受体酪氨酸激酶的细胞内底物之一是PI-3激酶。目前，多种胰岛素受体酪氨酸激酶底物已被报道，但尚不清楚它们是否是具有真正生理作用的酪氨酸激酶底物。去年，有人提出 PI3 激酶（PI 转换中的一种新酶）可能是胰岛素信号转导的介质之一，我们研究了纯化的胰岛素受体是否可以在体外系统中响应胰岛素而被磷酸化。。结果表明，PI3激酶的85K亚基被激活的胰岛素受体酪氨酸激酶磷酸化，并且这种酪氨酸磷酸化导致了PI3激酶的激活。根据体外和体外结果，几乎可以肯定PI3激酶是胰岛素受体酪氨酸激酶的生理底物之一。 2. I型葡萄糖转运蛋白（GLUT1）我们分离了促进转录的小鼠葡萄糖转运蛋白（GLUT1）基因。细胞生长因子的表达并分析其表达调控机制。结果，我们发现了两个增强子元件。一是在 5' 端上游 3.5 kb 附近存在包含 AP1 和 SRE 的增强子元件。我们还发现第二个内含子中存在增强子元件。我们目前正在研究这两个增强子元件如何参与细胞生长因子的转录促进。