サイトカインのシグナル制御機構とその破綻

细胞因子信号控制机制及其分解

基本信息

批准号：
13GS0011
负责人：
吉村昭彦
金额：
$ 217.57万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Creative Scientific Research
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

Spred/Sproutyファミリー分子はRas/Rafに結合して、ERK/MAP kinase経路を抑制する調節因子である。Spredは哺乳類では3種類報告されており、我々はSpred1,Spred2それぞれのノックアウト(KO)マウスを作製し、解析を行ってきた。Spred1はマスト細胞や好酸球などの末梢血液細胞の増殖を、Spred2は胎児期の血球発生を負に制御することを示した。我々はSprouty2やSprouty4がVEGFのシグナルを抑制する可能性について生化学的に検討した。その結果、Sprouty4はEGFによるERKの活性化には全く影響しなかったが、VEGFによるRafおよびERKの活性化はSprouty4により完全に抑制されることを示した。Sprouty4は活性化型PKCδによるRafの活性化も完全に抑制した。またSprouty4はC末端のRaf結合モチーフを介してRafを直接相互作用することも明らかにした。これらの結果から我々はSprouty4はVEGFRのシグナルのうちPLCγ-PKCδ-Raf経路をC末端の領域を介して抑制するという説を提唱した。さらにSprouty2-KOマウスを用いた解析からSprouty2はGDNFシグナルを負に制御し消化管神経の生存や神経ネットワーク形成を統御する重要な分子であることを示した。ショウジョウバエの表現型とあわせて考察すればSproutyは気管系や神経系などネットワーク構造の正確なリモデリングに重要な役割を担っていると思われる。Spredはもともと造血組織に多く発現し、Spred-1,Spred-2それぞれの単独KOマウスも好酸球、マスト細胞、赤血球などの産生充進が認められた。Spred1/Spred-2のDKOマウスはリンパ管の過形成によりE12〜14に死亡する。SpredはVEGF-Cのシグナルをリンパ管内皮細胞内で制御するのか、あるいは血球細胞と血管/リンパ管前駆細胞との相互作用を調節するか、いずれかの作用があるものと考えられる。

Spred/Sprouty 家族分子是与 Ras/Raf 结合并抑制 ERK/MAP 激酶通路的调节因子。哺乳动物中已报道了三种类型的 Spred，我们已经生成并分析了 Spred1 和 Spred2 敲除 (KO) 小鼠。我们发现 Spred1 负向调节外周血细胞（如肥大细胞和嗜酸性粒细胞）的增殖，而 Spred2 负向调节胎儿期的血细胞发育。我们通过生化研究了 Sprouty2 和 Sprouty4 抑制 VEGF 信号的可能性。结果显示，Sprouty4对EGF诱导的ERK激活没有影响，但VEGF诱导的Raf和ERK激活被Sprouty4完全抑制。 Sprouty4 还通过激活 PKCδ 完全抑制 Raf 激活。我们还发现 Sprouty4 通过 C 端 Raf 结合基序直接与 Raf 相互作用。基于这些结果，我们提出Sprouty4通过其C末端区域抑制VEGFR信号中的PLCγ-PKCδ-Raf通路。此外，使用Sprouty2-KO小鼠的分析表明，Sprouty2是负调节GDNF信号并控制胃肠神经存活和神经网络形成的重要分子。当与果蝇表型一起考虑时，Sprouty 似乎在精确重塑气管系统和神经系统等网络结构方面发挥着重要作用。 Spred 最初在造血组织中大量表达，Spred-1 和 Spred-2 单一敲除的小鼠也显示出嗜酸性粒细胞、肥大细胞和红细胞的产生增强。 Spred1/Spred-2 DKO 小鼠在 E12-14 时因淋巴增生而死亡。 Spred 被认为具有调节淋巴内皮细胞内 VEGF-C 信号或调节血细胞与血管/淋巴管祖细胞之间相互作用的作用。