シトクロムP-450電子伝達系の臓器特性と酵素反応機構

细胞色素P-450电子传递链的器官特征及酶反应机制

基本信息

批准号：
63570117
负责人：
市川佳幸
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kagawa Medical School
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

シトクロムP-450(以下P-450と略)の臓器特性は、P-450の質的変化即ちアイソザイムの違いによるもので単に量的違いによるものではない。我々はウシ副腎皮質ミトコンドリアよりP-450scc(コレステロール側鎖切断酵素)並びにP-45011β(ステロイド11β-水酸化酵素)や副腎皮質ミクロソームのP-450s21(P-450c21)ステロイド21-水酸化酵素)を精製し、電気泳動的に単一蛋白質とし、これらP-450アイソザイムをそれぞれウサギに注射し、P-450アイソザイムの免疫抗体を作成した。これらを使用して脳や脳下垂体のP-450アイソザイムについて調べた。その結果P-450sccについては大脳白質、脳橋、小脳脚や延髄等のミトコンドリアに局在していることが見出された。加えて、下垂体にP-450sccは局在していることが分かった。以上の研究結果は、脳、小脳や脳下垂体がそれ自体でコレステロールの側鎖切断等のステロイド代謝を行っていることを示し、ステロイドホルモンの生合成を副腎皮質や卵巣、睾丸のみならず行っていることを示唆している。脳はステロイド代謝の内でも狭義のステロイド代謝のみならずビタミンD_3(コレカルシフェロール)のようなステロイドも代謝していることが分かった。これもP-450アイソザイムによっているため、P-450アイソザイム間の異同についても検討中である。脳下垂体については各種異った細胞で構成されているので、どの細胞であるかについての同定の研究を進めている。P-450モノオキシゲナーゼ系の各合成の分子構造については、まず大量に存在するウ副腎皮質のP-450sccを大量精製し、酵素活性化機構を調べた。P-450sccが電子供与体である副腎(1)フェレドキシンと結合する事によりEPR的に特有の構造変化のあることを確認した。又、副腎フェレドキシンのC末端には色々のフロセッシングがあり、その機能について検討中である。

细胞色素P-450的器官特征（以下简称为P-450）是由于P-450的质量变化，即同工酶的差异，而不仅仅是定量差异。 We purified P-450scc (cholesterol side chain cleavage enzyme) and P-45011β (steroid 11β-hydroxylase) and P-450s21 (P-450c21)steroid 21-hydroxylase) from bovine adrenocortic mitochondria, and electrophoretically converted to a single protein, and injected each of these P-450 isozymes into为P-450同工酶创建免疫抗体的兔子。这些用于研究大脑和垂体中的P-450同工酶。结果，发现P-450SCC定位于线粒体，例如大脑白质，pons，小脑椎弓根和髓质长圆形。此外，发现P-450SCC位于垂体中。上述研究结果表明，大脑，小脑和垂体本身进行类固醇代谢，例如胆固醇的侧链断裂，这表明类固醇激素的生物合成不仅在肾上腺皮质，卵巢和睾丸中进行。已经发现，在大脑的类固醇代谢中，不仅在狭窄的意义上，而且在类固醇中，还包括维生素D_3（胆固醇）。这也是由于P-450同工酶，因此我们还考虑了P-450同工酶之间的差异。垂体由各种不同的细胞组成，因此我们目前正在研究它是哪种细胞的鉴定。关于P-450单加氧化酶系统的每种合成的分子结构，首先通过大量存在大量肾上腺皮质菌的质量纯化P-450SCC来检查酶激活机制。已证实P-450SCC与电子供体肾上腺（1）是电子供体的Ferredoxin结合，并且存在独特的EPR特异性结构变化。此外，肾上腺铁蛋白的C末端有各种苔藓，目前正在研究其功能。