Die Rolle einer Halogenase und einer "Nicht-Häm-Haloperoxidase" in der Biosynthese des Glykopeptid-Antibiotikums Balhimycin

卤化酶和“非血红素卤过氧化物酶”在糖肽抗生素巴希霉素生物合成中的作用

• 批准号: 5225008
• 负责人: Professor Dr. Wolfgang Wohlleben
• 金额: --
• 依托单位: Lehrstuhl für Mikrobiologie / Biotechnologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1998-12-31 至 2005-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5225008?language=en
• 关键词: Die; Rolle; einer; Halogenase; und

Die Funktion von NADH-abhängigen Halogenasen und "Nicht-HämHaloperoxidasen" soll anhand der Biosynthese des zweifach chlorierten Glykopeptid-Antibiotikums Balhimycin analysiert werden. Im Balhimycin-Biosynthesegencluster von A. mediterranei konnten wir erstmals sowohl ein Gen für eine NADH-abhängige Halogenase (bhA) als auch ein Gen für eine "Nicht-Häm-Haloperoxidase" (bhp) identifizieren. Durch Genunterbrechungs-Mutagenesen konnte gezeigt werden, daß ausschließlich die Halogenase BhaA für die Chlorierung von Balhimycin verantwortlich ist. Zuerst soll im vorliegenden Projekt die genaue Funktion des bhaA-Gens durch "in frame" Deletion aufgeklärt und die Substrat-/Cosubstratspezifität von BhaA durch Überexpressionsexperimente ermittelt werden. Da das "Nicht-Häm-Haloperoxidase"-ähnliche Gen bhp nicht an der Chlorierung von Balhimycin beteiligt ist, soll auch seine Funktion durch Mutationsanalysen, Überexpression und den Versuch der heterologen Komplementation der bhp-Mutante mit Hilfe anderer "Nicht-Häm-Haloperoxidasen" aus Streptomyceten ermittelt werden. Die Operonstruktur beider Gene und der Zeitpunkt der Expression soll durch RNA-Techniken bestimmt werden. Der Vergleich der Ergebnisse soll die Klärung der unterschiedlichen Funktion von Halogenasen und "Nicht-Häm-Haloperoxidasen" ermöglichen.

The Balhimycin-Biosty-Analysed Cluster Von A. Balhimycin-Biosty-Analysed Cluster Von A. Balhimycin-Biosty-Antibiooxidase (bhA) The Durch Genunter BhaA's "in frame" Deletion of Substrat-/Cosubstrates Überexpressionsexperimente ermittelt werden. Da das "Nicht-Häm-Haloperoxidase"-ähnliche Gen bhp nicht an der Chlorierung von Balhimycin beteiligt ist, soll auch seine Funktion durch Mutationsanalysen, Überexpression und den Versuch der heterologen Komplementation der bhp-Mutante mit Hilfe anderer “ nicht-häm-Halogeroxidasen” Aus链霉菌Ermittelt Werden。 Die Opernstruktur beider基因和Zeitpunkt der表达式Soll Durch rna-techniken bestimt werden。世界上最好的是卤素世界上最好的。世界上最好的是世界上最好的。