Überexpression von Interferon tau (IFN-tau) in in vitro produzierten Rinderembryonen

体外产生的牛胚胎中干扰素 tau (IFN-tau) 的过度表达

• 批准号: 5195902
• 负责人: Professor Dr. Karl Schellander
• 金额: --
• 依托单位: Abteilung Tierzucht und Tierhaltung
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1998-12-31 至 2001-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5195902?language=en
• 关键词: berexpression; von; Interferon; tau; IFN

Die frühembryonale Mortalität ist die wichtigste Ursache der Trächtigkeitsverluste beim Rind. Mitverantwortlich könnte dafür eine unzureichende Interferon-t (IFN-t) Produktion des Embryos sein, die zu einer Nichterkennung der Trächtigkeit von seiten des Muttertieres führt. Das Ziel dieses Forschungsprojekts ist die Erhöhung der Trächtigkeitsrate durch Transfer von in vitro produzierten Embryonen, die das antiluteolytische Protein INF-t über den Weg des Gentransfers überexprimieren. Dazu werden in einem ersten Schritt verschiedene zu testende DNA-Konstrukte pronuklear bzw. zytoplasmatisch in IVP-Embryonen injiziert und die Expression von INF-t am 7./8. Entwicklungstag mittels RTPCR ermittelt. Die DNA-Konstrukte werden spezifisch für nukleare- und zytoplasmatische Injektion konzipiert. Als Promotoren werden dabei der b-Aktin und der endogene INF-t Promoter verwendet. Die DNA-Konstrukte erhalten ein Reportergen (Neomycin-Resistenz oder Grün-Fluoreszenz-Protein). Für die zytoplasmatische Injektion enthalten die Konstrukte zusätzlich eine murine Amplifikationssequenz. Aus diesen Exerimenten wird ein geeignetes Konstrukt für den spermienvermittelten DNATransfer zur Erzeugung transgener Embryonen ausgewählt. Im zweiten Schritt werden diese transgenen Embryonen gleichzeitig mit den Kontrollembryonen zum Studium ihrer Entwicklungsfähigkeit in 200 Rezipienten transferiert und die Trächtigkeitsraten am Tag 60 analysiert.

Die frühembryonale Mortalität ist die wichtigste Ursache der Trächtigkeitsverluste beim Rind。未来。 DNA-Konstrukte 原核 bzw。 IVP-Embryonen injiziert und die 表达 von INF-t am 7./8。 DNA-Konstrukte erhalten ein Reportergen（新霉素抗性或 Grün-Fluoreszenz-蛋白质）。扩增序列。 DNA 转移到转基因胚胎中。 200 次重新传输和标签 60 分析中的 Trächtigkeitsraten 中的使用情况。