Apert症候群疾患遺伝子を応用した顎下腺における上皮間葉相互作用の解明

使用阿佩尔综合征疾病基因阐明颌下腺上皮间质相互作用

• 批准号: 17K18033
• 负责人: 森田 淳平
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: Kyushu Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-04-01 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17K18033/
• 关键词: 顎下腺; Apert症候群; FGFR2; 分枝形態形成; 先天性疾患; 上皮間葉相互作用

Apert症候群は頭蓋冠早期癒合症、四肢の合指症を主症状とする先天性疾患で、線維芽細胞増殖因子2型受容体（FGFR2）の一塩基変異（S252WまたはP253R）が原因とされている。Apert症候群患者で唾液量が増大している所見が臨床経験から示唆されるが臨床的及び基礎的報告はない。またFGFR2を介する情報伝達は唾液腺の発生に関与していることが知られている。今回使用したApert症候群モデルマウス（Apマウス）はApert症候群患者の3/4に認められるFGFR2の遺伝子変異（S252W）によりFGFR2の機能亢進を示す。このApマウスをFGFR2の機能亢進モデルとして顎下腺におけるFGFR2の役割を検索し、Apert症候群の病態解析を行ったACTB-Cre＋/＋マウスとFGFR2+/Neo-S252Wを交配して得た、Apマウスを実験群、ACTB-Cre＋/－マウスを対照群として使用した。生後1日齢で、頭部を摘出し、パラフィン包埋後矢状断で薄切し、HE染色を行い、顎下腺を観察した。小葉の数、小葉の総面積、小葉の平均面積と顎下腺の単位面積あたりの実質が占める割合を、画像解析ソフトウェア（ImageJ）を用いて計測した。統計的解析はMann Whitney Utestを行い、有意水準はP<0.05とした。小葉の数はApマウスで少なかった。小葉の総面積に有意差は認めず、小葉の平均面積はApマウスで大きかった。顎下腺の単位面積あたりの実質が占める割合はApマウスで大きく、これはFgfr2bノックアウトマウスで顎下腺の上皮性細胞の増殖が抑制されるため実質が小さいという報告と整合性のある結果だった。Apマウスでは、FGFR2機能亢進が原因と思われる顎下腺の形態変化が示され、上皮性細胞の増殖が亢進している可能性が示唆された。

APERT综合征是一种先天性疾病，其中钙化早期的同义词和四肢的联合性是主要症状，是由成纤维细胞生长因子2型受体（FGFR2）的单个核苷酸突变（S252W或P253R）引起的。临床经验表明，APERT综合征患者的唾液量增加，但不存在临床或基本报告。众所周知，FGFR2介导的信息传输参与唾液腺的发展。本研究中使用的APERT综合征模型小鼠（AP小鼠）显示，由于APERT综合征患者的3/4患者在3/4中观察到FGFR2的过度功能。搜索了该AP小鼠在下颌下腺中的作用，作为FGFR2的过度功能模型，并通过交叉ACTB-CRE+/+小鼠获得AP小鼠，该小鼠已接受APERT综合征的病理学分析，AP小鼠被用作实验组和ACTB-CRE +/--CRE +/- +/- mICE组作为对照组。出生后的一天，去除头部，石蜡嵌入后切片切片，进行染色，并观察到下颌腺。使用图像分析软件（ImageJ）测量了小叶的数量，小叶总面积，小叶面积，平均面积和下颌腺的每单位面积的比例。统计分析由Mann Whitney Utest进行，显着性水平为P <0.05。 AP小鼠的小叶叶数很少。裂片的总面积没有显着差异，而AP小鼠的叶平均面积很大。在AP小鼠中，下颌下腺的每单位面积的实质比例很大，这与薄壁组织很小的报道一致，因为在FGFR2B敲除小鼠中抑制了下皮腺体上皮细胞的增殖。在AP小鼠中，认为是由HyperFGFR2引起的下颌下腺的形态变化，表明上皮细胞的增殖可能会增加。