Apert症候群疾患遺伝子を応用した顎下腺における上皮間葉相互作用の解明

使用阿佩尔综合征疾病基因阐明颌下腺上皮间质相互作用

• 批准号: 17K18033
• 负责人: 森田 淳平
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: Kyushu Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-04-01 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17K18033/
• 关键词: 顎下腺; Apert症候群; FGFR2; 分枝形態形成; 先天性疾患; 上皮間葉相互作用

Apert症候群は頭蓋冠早期癒合症、四肢の合指症を主症状とする先天性疾患で、線維芽細胞増殖因子2型受容体（FGFR2）の一塩基変異（S252WまたはP253R）が原因とされている。Apert症候群患者で唾液量が増大している所見が臨床経験から示唆されるが臨床的及び基礎的報告はない。またFGFR2を介する情報伝達は唾液腺の発生に関与していることが知られている。今回使用したApert症候群モデルマウス（Apマウス）はApert症候群患者の3/4に認められるFGFR2の遺伝子変異（S252W）によりFGFR2の機能亢進を示す。このApマウスをFGFR2の機能亢進モデルとして顎下腺におけるFGFR2の役割を検索し、Apert症候群の病態解析を行ったACTB-Cre＋/＋マウスとFGFR2+/Neo-S252Wを交配して得た、Apマウスを実験群、ACTB-Cre＋/－マウスを対照群として使用した。生後1日齢で、頭部を摘出し、パラフィン包埋後矢状断で薄切し、HE染色を行い、顎下腺を観察した。小葉の数、小葉の総面積、小葉の平均面積と顎下腺の単位面積あたりの実質が占める割合を、画像解析ソフトウェア（ImageJ）を用いて計測した。統計的解析はMann Whitney Utestを行い、有意水準はP<0.05とした。小葉の数はApマウスで少なかった。小葉の総面積に有意差は認めず、小葉の平均面積はApマウスで大きかった。顎下腺の単位面積あたりの実質が占める割合はApマウスで大きく、これはFgfr2bノックアウトマウスで顎下腺の上皮性細胞の増殖が抑制されるため実質が小さいという報告と整合性のある結果だった。Apマウスでは、FGFR2機能亢進が原因と思われる顎下腺の形態変化が示され、上皮性細胞の増殖が亢進している可能性が示唆された。

阿佩尔综合征是一种先天性疾病，其主要症状包括颅骨早闭和肢体并趾，被认为是由成纤维细胞生长因子2受体（FGFR2）的单核苷酸突变（S252W或P253R）引起的。临床经验提示Apert综合征患者唾液量增加，但尚无临床或基础报道。还已知通过 FGFR2 的信息传递参与唾液腺的发育。此次使用的Apert综合征模型小鼠（Ap小鼠）由于FGFR2基因突变（S252W）而表现出FGFR2功能亢进，这种突变存在于四分之三的Apert综合征患者中。使用该Ap小鼠作为FGFR2功能亢进的模型，研究了FGFR2在下颌下腺中的作用并分析了Apert综合征的病理学。将ACTB-Cre+/+小鼠与FGFR2+/Neo-S252W杂交获得的Ap小鼠用作。实验组为ACTB-Cre+/-小鼠，对照组为ACTB-Cre+/-小鼠。 1日龄时，取出头部，石蜡包埋，矢状切片，HE染色，观察颌下腺。使用图像分析软件（ImageJ）测量小叶数量、小叶总面积、小叶平均面积以及颌下腺单位面积实质所占比例。采用Mann Whitney Utest进行统计分析，显着性水平设定为P<0.05。 Ap 小鼠的小叶数量较低。 Ap小鼠的总小叶面积没有显着差异，并且平均小叶面积更大。 Ap小鼠下颌下腺单位面积的实质比例较大，这与Fgfr2b敲除小鼠下颌下腺上皮细胞增殖受到抑制而具有较小的实质的报道一致。在 Ap 小鼠中，下颌下腺的形态变化似乎是由 FGFR2 功能亢进引起的，表明上皮细胞增殖可能增强。