聴覚関連遺伝子Fkbp5の機能解析と急性感音難聴の病態解明

听力相关基因Fkbp5的功能分析及急性感音神经性耳聋病理的阐明

基本信息

批准号：
16K20248
负责人：
大道亮太郎
金额：
$ 2.5万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2016
资助国家：
日本
起止时间：
2016-04-01 至 2018-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

平成29年度にはFkbp5ホモノックアウトマウスの系統を確立し、その聴力を検討した。6-8週齢ホモノックアウトマウスの聴性脳幹反応閾値には（42.1±12.5dB SPL、n=12、クリックABR)、6週齢野生型マウスの聴力閾値(37.1±7.5dB SPL、n=9)と有意差を認めなかった（p=0.146, t-test）。平成30年4月現在、Fkbp5ホモノックアウトマウスの系統を維持し、引き続き強大音響暴露により難聴を惹起させた条件等での聴力を検討している。当研究の目的は、急性感音難聴における、Fkbp5を含む、グルココルチコイドシグナリングの機能を解明することである。従って平成29年度には雌6週齢野生型マウスを120dBオクターブバンドノイズに暴露して急性感音難聴を発症させ、蝸牛でのグルココルチコイドシグナリング関連遺伝子の発現を検討した。RT-PCRアレイを用いて、グルココルチコイドレセプターおよび、その下流の転写因子11種類と、その他、グルココルチコイドシグナリングによる制御を受けると報告されている遺伝子の発現を、合計84種類検討した。難聴発症後12時間後には、そのうち92.9% (84遺伝子中78遺伝子)では、難聴発症群と、コントロール群の間で有意な変動はみとめなかった。2倍以上または1/2以下の、有意な変動を認めた遺伝子（p<0.05, n=3）として、Aqp1 (Aquaporin 1), Diras2 (DIRAS family, GTP-binding RAS-like 2),Has2 (Hyaluronan synthase 2), Il1rn (Interleukin 1 receptor antagonist), Il6ra (Interleukin 6 receptor, alpha), Pou2f2 (POU domain, class 2, transcription factor 2)を同定した。　以上の結果より、騒音暴露による難聴発症時の蝸牛では、内因性のグルココルチコイドによる、グルココルチコイドシグナリング遺伝子の大幅な変動はみとめなかった。今後の研究に関して、グルココルチコイドの全身投与、鼓室内投与によって、免疫関連遺伝子等の発現は変動すると予想される。

2017年，建立了FKBP5同型小鼠的菌株，并检查了其听力能力。在6-8周龄的同型同型小鼠（42.1±12.5 dB Spl，n = 12，单击ABR）和6周龄的野生型小鼠（37.1±7.5 dB SPL，n = 9）（p = 0.146，t-test）中，听觉脑干反应阈值没有显着差异。截至2018年4月，维持FKBP5同型小鼠的菌株，在导致听力较大的声学暴露导致听力损失的条件下继续听力能力。这项研究的目的是阐明糖皮质激素信号传导的功能，包括FKBP5在急性感觉神经性听力损失中。因此，在2017年，将6周龄的雌性野生型小鼠暴露于120 dB八度带噪声中，以产生急性的感官听力损失，并研究了耳蜗中糖皮质激素信号相关基因的表达。使用RT-PCR阵列，我们总共研究了84种糖皮质激素受体和11个下游转录因子的表达，以及其他据报道受糖皮质激素信号控制的基因。听力损失12小时后，92.9％（84个基因中的78个）在听力损失组和对照组之间没有显着差异。鉴定为2倍或更少或小于1/2的显着变化的基因被鉴定为基因（p <0.05，n = 3），显着变化2倍或更少，例如n = 3。从上述结果中，我们没有注意到由于噪声暴露导致听力损失时，由内源性糖皮质激素引起的糖皮质激素信号转导基因发生了任何显着变化。关于未来的研究，预计免疫相关基因等的表达将根据糖皮质激素的全身施用和内胰腺内给药而变化。