乾癬の病態形成における好中球の役割

中性粒细胞在银屑病发病机制中的作用

• 批准号: 16K19726
• 负责人: 志賀 建夫
• 金额: $ 2.41万
• 依托单位: Kochi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-01 至 2017-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16K19726/
• 关键词: 乾癬; 好中球; 好中球エラスターゼ; IL-17; TNF; エラスターゼ阻害薬

当初の計画に基づき、既に乾癬のモデルマウスとして確立されているK5.Stat3c遺伝子改変マウスを用いて実験を開始した。K5.Stat3cマウスでは1日おきに12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate(TPA)を2回塗布することで比較的速やかに、病理組織学的に好中球の浸潤を伴う乾癬類似の病変を生じる。そこで遺伝子改変を受けていない野生型マウスとK5.Stat3cマウスの両側耳介に初日と3日目にTPAを塗布した。その間連日、右耳介には好中球エラスターゼ阻害薬をアセトンに溶解したものを塗布、左耳介には対照コントロールとしてアセトンを塗布した。野生型マウスは3匹とも右耳介に0.5％濃度の好中球エラスターゼ阻害薬を塗布、K5.Stat3cマウスについては0.01％、0.1％、0.5％濃度の好中球エラスターゼ阻害薬を3匹ずつに塗布した。連日耳介の厚さを測定し、4日目にダーモスコピーを用いて写真撮影を行った後、サンプリングして病理組織学的な検討を行った。ダーモスコピーで観察を行うと、野生型マウスではTPAを塗布しても大きな変化はみられなかったが、K5.Stat3cマウスでは乾癬に類似した鱗屑と耳介の腫脹が生じていた。一方、TPAに加えて0.1％の好中球エラスターゼ阻害薬を塗布した群では明らかに鱗屑が減少していた。耳介の厚さを経時的に測定すると、野生型マウスでは有意な耳介肥厚はみられなかったが、遺伝子改変マウスでは徐々に耳介が肥厚した。0.1％および0.5％の好中球エラスターゼ阻害薬を塗布した2群では、耳介の肥厚が抑制された。また病理学的には真皮への炎症細胞浸潤が軽減する傾向がみられた。

基于原始计划，使用K5.STAT3C转基因小鼠开始实验，这些小鼠已经建立为牛皮癣的模型小鼠。 K5.STAT3C小鼠每隔一天两次接受12-O-四烷酰基-13-乙酸酯（TPA），以产生相对较快的，牛皮癣的病变，并伴有组织病理性嗜中性粒细胞浸润。在这种情况下，野生型小鼠和K5.STAT3C小鼠的两侧耳是遗传改变的，并在第一天和第三天应用TPA。在此期间，将右上力壳与溶解在丙酮中的中性粒细胞弹性酶抑制剂涂覆，并将左耳涂在丙酮中作为对照对照。将所有三只野生型小鼠与右Auriculo的浓度为0.5％的中性粒细胞弹性酶抑制剂涂覆，并将三只与中性粒细胞弹性酶抑制剂涂在0.01％，0.1％，0.1％和0.5％的K5.STATATATATAT3C小鼠中。每天都测量过耳的厚度，并在第四天使用皮肤镜检查拍摄照片，然后进行采样以进行组织病理学检查。用皮肤镜检查观察表明，应用TPA时在野生型小鼠中未观察到显着变化，但是K5.STAT3C小鼠显示出类似于牛皮癣的耳凝度溶解的缩放和肿胀。另一方面，在该组中，除了TPA外，还应用了0.1％中性粒细胞弹性酶抑制剂，尺度明显降低。当随着时间的流逝测量了耳的厚度时，在野生型小鼠中未观察到明显的耳liculus增厚，但是在转基因的小鼠中，耳环逐渐增厚。两组中性粒细胞弹性酶抑制剂的两组抑制了骨增厚。此外，从病理上讲，炎症细胞有减少真皮的趋势。