微生物感染を契機とするヒト腸管粘膜における自然免疫と獲得免疫間クロストーク

微生物感染引发的人体肠粘膜先天免疫与获得性免疫之间的串扰

基本信息

批准号：
15019005
负责人：
綾部時芳
金额：
$ 2.88万
依托单位：
Asahikawa Medical College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

微生物感染により生ずる腸粘膜上皮細胞と獲得免疫担当細胞のクロストークを検討するために、腸管自然免疫系では小腸パネート細胞のalpha-defensinおよび他の生理活性物質を,獲得免疫系ではリンパ球,単球等をターゲットとし,それらの間のクロストークを解析した。単離マウス小腸陰窩からわれわれの既報でパネート細胞顆粒を回収し、蛋白を得た。またマウス小腸陰窩をS. typhimurium等の細菌に曝露して得たPaneth細胞分泌物から蛋白を抽出した。さらに、cryptdin-1、cryptdin-3、cryptdin-4およびprocryptdin-1を精製した。これらのマウスのパネート細胞由来物質をターゲットとして、マウスの末梢血リンパ球および好中球に対するケモタキシス能を解析した。検討方法は、ケモタキシス・チャンバーを用いて共培養後の細胞を顕微鏡下で計測し,コントロールと比較した。パネート細胞由来分泌物とパネート細胞顆粒にリンパ球遊走能を認めた。次に,インフォームド・コンセントの下に単離正常ヒト小腸陰窩を採取し,ヒトのパネート細胞顆粒および細菌に曝露して得た分泌物から蛋白を得た。血液系細胞は,健常ボランティアの末梢血からリンパ球(T細胞),単球等を選択的に採取した。上記と同様の方法でケモタキシス能を検討した結果、パネート細胞顆粒と分泌物において単球に対する遊走活性を認めた。

为了研究肠粘膜上皮细胞与由微生物感染引起的获得的免疫细胞之间的串扰，我们靶向小肠免疫系统中的小肠道恐怖细胞中的α-防御素和其他生理活性物质，以及淋巴细胞，单细胞等的淋巴细胞，以及在获得的免疫系统中，并分析了它们之间的免疫系统。在我们先前报道的病例中，从分离的小鼠小肠道隐窝中收集菠萝细胞颗粒以获得蛋白质。还从paneth细胞分泌物中提取蛋白质，通过将小鼠小肠隐窝暴露于鼠伤寒链球菌等细菌中。此外，纯化了cryptdin-1，cryptdin-3，cryptdin-4和procryptdin-1。使用来自这些小鼠的泛细胞衍生的物质，分析了小鼠外周血淋巴细胞和中性粒细胞的趋化毒素能力。该方法是在显微镜下使用趋化室共培养后测量细胞，并将其与对照进行比较。在Paneto细胞衍生的分泌物和Paneto细胞颗粒中观察到淋巴细胞迁移能力。接下来，根据知情同意，收集了孤立的正常人类小肠隐窝，并从人类泛岩细胞颗粒中获得蛋白质，并通过暴露于细菌获得的分泌物获得了分泌物。从健康志愿者的外周血中选择性收集淋巴细胞（T细胞），单核细胞等。由于使用与上述相同的方法研究了趋化能力的结果，在Panate细胞颗粒和分泌物中观察到针对单核细胞的迁移活性。