セマフォリンをターゲットとした自己免疫疾患制御の試み

尝试通过靶向信号蛋白来控制自身免疫性疾病

• 批准号: 20060016
• 负责人: 竹ヶ原 宜子
• 金额: $ 6.14万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20060016/
• 关键词: セマフォリン; 自己免疫疾患; 骨代謝疾患; 破骨細胞; ヘルパーT細胞

本研究ではセマフォリン-セマフォリン受容体を介したシグナルによる自己免疫疾患、骨代謝疾患の制御作用を明らかにするとともに、セマフォリンをターゲットとした自己免疫疾患制御を目指す。昨年までに、骨代謝疾患を担う破骨細胞のモデル細胞であるRAW264.7を用いた解析から、セマフォリン受容体plexin-A1に会合するシグナル伝達分子FARP2が破骨細胞に発現し、破骨細胞分化に関与することを見出している。本年度はドミナントネガティブ型FARP2(ΔGEF-FARP2)をRAW24.7細胞に強制発現させた株化細胞およびFARP2遺伝子欠損マウスを用いてFARP2による破骨細胞多核化制御作用を詳細に検討した。すると、ΔGEF-FARP2細胞を用いた解析から(1)ΔGEF-FARP2細胞では細胞骨格を形成するアクチン繊維構造が変化し、破骨細胞に認められるPodosome-beltの形成が障害されていた。(2)FRET法を用いて時空間的なRacの活性化を検討し、コントロール細胞で認められたpodosome-beltに特異的なRacの活性化がΔGEF-FARP2発現細胞では認められなかった。(3)ΔGEF-FARP2発現細胞はコントロール細胞に比べてインテグリンの活性が高く、細胞外基質に対する接着活性が顕著に高い、ということが明らかになった。また、FARP2欠損マウスを用いて、in vitroにて破骨細胞分化誘導実験を行った。するとFARP2欠損細胞はRANKL刺激による破骨細胞分化マーカーの発現は正常であるにもかかわらず、多核破骨細胞の形成が障害され、FARP2が破骨細胞多核化に重要な分子であることが明らかとなった。

本研究旨在阐明semaphorin-semaphorin受体介导的信号对自身免疫性疾病和骨代谢疾病的调节作用，并通过靶向semaphorin来控制自身免疫性疾病。直到去年，使用负责骨代谢疾病的破骨细胞模型细胞RAW264.7进行的分析表明，与信号蛋白受体丛蛋白-A1相关的信号转导分子FARP2在破骨细胞中表达，并发现它与骨代谢疾病相关。参与细胞分化。今年，我们使用在RAW24.7细胞和FARP2基因缺陷小鼠中强制表达显性失活FARP2（ΔGEF-FARP2）的细胞系，详细研究了FARP2对破骨细胞多核调节的影响。然后，使用ΔGEF-FARP2细胞进行分析表明，(1)在ΔGEF-FARP2细胞中，形成细胞骨架的肌动蛋白纤维结构发生改变，并且在破骨细胞中观察到的足小体带的形成受到损害。 (2)使用FRET检查时空Rac激活，在对照细胞中观察到的足体带特异性Rac激活在表达ΔGEF-FARP2的细胞中没有观察到。 (3)表明表达ΔGEF-FARP2的细胞比对照细胞具有更高的整合素活性和显着更高的细胞外基质粘附活性。此外，我们使用FARP2缺陷小鼠进行了体外破骨细胞分化诱导实验。尽管在 FARP2 缺陷细胞中，RANKL 刺激后破骨细胞分化标记物的表达正常，但多核破骨细胞的形成受到损害，这表明 FARP2 是破骨细胞多核化的重要分子。

项目成果

Roles of Sema4D-Plexin-B1 Interactions in the Central Nervous System for Pathogenesis of Experimental Autoimmune Encephalomyelitis

• DOI: 10.4049/jimmunol.0903302
• 发表时间: 2010-02-01
• 期刊: JOURNAL OF IMMUNOLOGY
• 影响因子: 4.4
• 作者: Okuno, Tatsusada;Nakatsuji, Yuji;Kumanogoh, Atsushi
• 通讯作者: Kumanogoh, Atsushi

Involvement of Sema4A in the progression of experimental autoimmune myocarditis

• DOI: 10.1016/j.febslet.2008.10.040
• 发表时间: 2008-11-26
• 期刊: FEBS LETTERS
• 影响因子: 3.5
• 作者: Makino, Nobuhiko;Toyofuku, Toshihiko;Kumanogoh, Atsushi
• 通讯作者: Kumanogoh, Atsushi

Involvement of a guanine nucleotide exchange factor, FARP2, osteoclastogenesis

鸟嘌呤核苷酸交换因子 FARP2 参与破骨细胞生成

• 发表时间: 2008
• 作者: Ito;T.;Takegahar a Noriko
• 通讯作者: Takegahar a Noriko

Repulsive and attractive semaphorins cooperate to direct the navigation of cardiac neural crest cells

• DOI: 10.1016/j.ydbio.2008.06.028
• 发表时间: 2008-09-01
• 期刊: DEVELOPMENTAL BIOLOGY
• 影响因子: 2.7
• 作者: Toyofuku, Toshihiko;Yoshida, Junko;Kikutani, Hitoshi
• 通讯作者: Kikutani, Hitoshi

Involvement of semaphorin-plexin signaling in regulation of osteo clastogenesis

信号蛋白-丛蛋白信号传导参与破骨细胞生成的调节

• 发表时间: 2009
• 作者: Sawatani Y;Miyamoto T;Nagai S;Maruya M;Imai J;Fujita N;Miyamoto K;Ninomiya K;Suzuki T;Iwasaki R;Toyama Y;Koyasu S;Suda T.;Mineko Tsuruoka;Takegahara N
• 通讯作者: Takegahara N