スピンドルチェックポイントの制御機構-力計測・分子操作・顕微動態解析による研究-

主轴检查点的控制机制 - 利用力测量、分子操纵和微动力学分析进行研究 -

基本信息

批准号：
20058035
负责人：
板橋岳志
金额：
$ 3.9万
依托单位：
Waseda University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20058035/
关键词：
細胞分裂細胞骨格

项目摘要

生体をとりまく物理的な環境とその変動は、発生・分化・増殖など、多くの細胞の機能発現や制御機構に関わっている。本研究では、正確な染色体分配を制御するスピンドルチェックポイントの解除シグナルとなる、"物理的な力"を定量化することで、この"物理的なシグナル"から"生化学的シグナル"への伝達機構、及びそのフィードバック機構の制御を明らかにすることを目的としている。今年度は、アフリカツメガエル卵抽出液中で形成させた中期紡錘体へ、ガラス微小針を用いて様々な力学的負荷をかけた時の紡錘体の応答、キネトコア動態の変調について、GFPタグをつけたセントロメア及びキネトコア局在タンパク質のイメージングにより、キネトコア間距離の変化に注目して調査した。極間方向へ紡錘体を引き伸ばす力学的負荷は、キネトコア間距離を増加させると予測されていたが、同負荷を与えた際、減数分裂中期紡錘体の特異的な構造上、骨格である微小管同士にずれが発生するため、著しいキネトコア間距離の増加、及び動態の変化は観察されなかった。この際、生ずる微小管同士のずれ、及びそのずれを修復する際の微小管のダイナミクス変化(微小管量、紡錘体極方向への微小管の流れの速度変化等)について、学会にて発表した。また、ピエゾ抵抗カンチレバーを用いて、動物培養細胞中の中期紡錘体へ、力学的負荷をかけた際の有糸分裂中期進行とスピンドルチェックポイントへの影響を現在解析している。

围绕生物体及其变化的物理环境涉及许多细胞的功能表达和调节机制，包括发育，分化和增殖。这项研究旨在通过量化“物理力”来阐明从该“物理信号”传输到“生化信号”及其反馈机制的机制，该信号是阻止纺锤体检查点的信号，该信号控制准确的染色体分布。今年，我们研究了使用玻璃微针在Xenopus Egg提取物中形成的中期纺锤体时，我们研究了主轴响应和动力学动力学调节，该纺锤体通过对GFP标记的Centromeres和Kinetocore局部化蛋白质进行成像，重点介绍了动力学距离的变化。预计在近极方向上伸展主轴的机械载荷会增加运动间距离，但是当施加相同的载荷时，由于减数分裂间的纺锤体的特异性结构而导致的骨骼微管之间发生位移，因此在基因赛间距离内无显着增加。目前，学术会议介绍了微管之间的未对准和微管的动态变化时，修复未对准（微管量，微管速度的变化，微管的速度变化，沿纺锤极的方向流动等）。此外，使用压电悬臂，我们目前正在分析中期进程和纺锤体检查点对动物培养细胞中的中期纺锤体的机械载荷的影响。