スピンドルチェックポイントの制御機構-力計測・分子操作・顕微動態解析による研究-

主轴检查点的控制机制 - 利用力测量、分子操纵和微动力学分析进行研究 -

基本信息

批准号：
20058035
负责人：
板橋岳志
金额：
$ 3.9万
依托单位：
Waseda University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20058035/
关键词：
細胞分裂細胞骨格

项目摘要

生体をとりまく物理的な環境とその変動は、発生・分化・増殖など、多くの細胞の機能発現や制御機構に関わっている。本研究では、正確な染色体分配を制御するスピンドルチェックポイントの解除シグナルとなる、"物理的な力"を定量化することで、この"物理的なシグナル"から"生化学的シグナル"への伝達機構、及びそのフィードバック機構の制御を明らかにすることを目的としている。今年度は、アフリカツメガエル卵抽出液中で形成させた中期紡錘体へ、ガラス微小針を用いて様々な力学的負荷をかけた時の紡錘体の応答、キネトコア動態の変調について、GFPタグをつけたセントロメア及びキネトコア局在タンパク質のイメージングにより、キネトコア間距離の変化に注目して調査した。極間方向へ紡錘体を引き伸ばす力学的負荷は、キネトコア間距離を増加させると予測されていたが、同負荷を与えた際、減数分裂中期紡錘体の特異的な構造上、骨格である微小管同士にずれが発生するため、著しいキネトコア間距離の増加、及び動態の変化は観察されなかった。この際、生ずる微小管同士のずれ、及びそのずれを修復する際の微小管のダイナミクス変化(微小管量、紡錘体極方向への微小管の流れの速度変化等)について、学会にて発表した。また、ピエゾ抵抗カンチレバーを用いて、動物培養細胞中の中期紡錘体へ、力学的負荷をかけた際の有糸分裂中期進行とスピンドルチェックポイントへの影響を現在解析している。

生物体周围的物理环境及其波动涉及许多细胞功能的表达和控制机制，包括发育、分化和增殖。在这项研究中，我们将量化作为控制染色体精确分离的纺锤体检查点释放信号的“物理力”，从而分析这种“物理信号”向“生化信号”的传递。明确其反馈机制及其控制机制。今年，我们将使用 GFP 标签来研究当使用玻璃微针对爪蟾卵提取物中形成的中期纺锤体施加各种机械载荷时，纺锤体的反应和着丝粒动力学的调节，我们重点关注着丝粒和着丝粒定位蛋白的变化。动粒之间的距离。据预测，沿极间方向拉伸纺锤体的机械载荷会增加动粒间距离，但由于减数分裂中期纺锤体的独特结构，当施加相同的载荷时，作为骨架的微管，由于着丝粒之间发生了转移，但没有观察到着丝粒之间距离的显着增加和动力学的变化。这次，我们在一个学术会议上提出了关于微管之间发生的错位，以及修复错位时微管动力学的变化（微管数量的变化、微管流向纺锤体两极的速度等）。 .此外，我们目前正在分析当使用压阻悬臂梁将机械载荷施加到培养动物细胞的中期纺锤体时对有丝分裂中期进展和纺锤体检查点的影响。