創薬標的分子としての新規γセクレターゼ活性制御因子群の解析

作为药物发现靶分子的新型 γ-分泌酶活性调节剂的分析

基本信息

批准号：
20023007
负责人：
富田泰輔
金额：
$ 4.86万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20023007/
关键词：
アルツハイマーセクレターゼアミロイド膜内配列切断

项目摘要

γセクレターゼは、アルツハイマー病(AD)発症機構に決定的な役割を果たすAβペプチドの産生の最終段階を担うプロテアーゼである。しかしその単純な阻害はNotchシグナル抑制による副作用を呈することが示されている。これまでにγセクレターゼ活性に対して、『基質特異性』を与える何らかの分子機構の存在が予想されており、APP特異的な切断活性制御機構は副作用のない新たなAD創薬標的分子機構として期待されている。申請者はRNA干渉法(RNAi)の効率がすぐれ、かつγセクレターゼ活性を持つことが当研究室において示されているショウジョウバエS2細胞を用い、ゲノムワイドなRNAiスクリーニング法によりγセクレターゼ活性に基質特異性を付与する分子を同定することを着想・遂行した。本年度は得られた遺伝子群のうちセラミド代謝に影響を与える分子GlcT-1ホモログであるGAMMO4のノックダウンはAβ 42産生を特異的に上昇させた。さらにスフィンゴ脂質およびセラミド代謝経路に関する分子を網羅的RNAiにより解析したところ、やはり複数の遺伝子がRNAiによってG1cT-1と同様にAβ 42産生上昇を引き起こした。またG1cT-1阻害剤であるPDMP処理を行うとやはりAβ 42産生上昇が観察された。これらの結果から、セラミド代謝経路はγ切断特異的に影響を及ぼし、Aβ 42産生量を調節していることが明らかとなった。すなわち、脂質環境、特にセラミド代謝の変化がγセクレターゼ活性に影響を与えAβ 42産生を変化させることが示唆された。

γ-分泌酶是一种蛋白酶，在 Aβ 肽的产生中发挥最后一步，而 Aβ 肽在阿尔茨海默病 (AD) 的发病机制中发挥着至关重要的作用。然而，由于 Notch 信号抑制，简单的抑制已被证明具有副作用。迄今为止，人们已预测存在某种分子机制赋予γ-分泌酶活性“底物特异性”，而APP特异性裂解活性控制机制有望成为AD药物发现的新靶点分子机制。副作用已经做了。申请人使用果蝇S2细胞，我们的实验室已证明该细胞具有出色的RNA干扰（RNAi）效率和γ-分泌酶活性，我们构想并使用全基因组RNAi筛选方法来确定γ-分泌酶活性的底物特异性。实现了识别具有的分子的想法。在今年获得的基因中，GAMMO4（一种影响神经酰胺代谢的分子 GlcT-1 的同源物）的敲除特别增加了 Aβ 42 的产生。此外，当通过综合RNAi分析与鞘脂和神经酰胺代谢途径相关的分子时，多个基因导致Aβ 42和G1cT-1的产生增加。此外，当用 G1cT-1 抑制剂 PDMP 处理时，还观察到 Aβ 42 产量增加。这些结果表明，神经酰胺代谢途径特异性影响 γ 裂解并调节 Aβ 42 的产生。换句话说，脂质环境的变化，特别是神经酰胺代谢的变化，会影响γ-分泌酶活性并改变Aβ 42 的产生。

项目成果

期刊论文数量（26）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Functional analysis of genetic modulators for the gamma-secretase activity

γ-分泌酶活性遗传调节剂的功能分析

DOI：
发表时间：
2009
期刊：
影响因子：
0
作者：
Laras Y;Pietrancosta N;Tomita T;Iwatsubo T;Kraus JL;Fukushima K;富田泰輔
通讯作者：
富田泰輔

Both Notchl and Notch2 contribute to the regulation of melanocyte stem cells

Notch1和Notch2都有助于黑素细胞干细胞的调节

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
Pigment Cell Melanoma Research 21
影响因子：
0
作者：
Kumano K;Masuda S;Sata M;Saito T;Lee SY;Yanagimoto-Sakata M;Tomita T;Iwatsubo T;Natsugari H;Kurokawa M;Ogawa S;Chiba S.
通讯作者：
Chiba S.

Both the N and C-terminal fragments of Presenilin 1 participate in the formation of the catalytic pore in gamma-secretase

Presenilin 1 的 N 和 C 末端片段均参与γ-分泌酶催化孔的形成