ATF-2遺伝子欠損による乳がんの発症メカニズム

ATF-2基因缺陷导致乳腺癌发生的机制

基本信息

批准号：
20013048
负责人：
前川利男
金额：
$ 8.7万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

これまで我々はメスのATF-2遺伝子ヘテロ欠損マウスを1年以上飼育すると高頻度で乳がんを発症する事を見つけ、ATF-2が癌抑制因子として機能している事を明らかにした。DNAマイクロアレーを用いて発癌のメカニズムを解析した結果、ATF-2遺伝子欠損細胞ではGadd45αとMaspin遺伝子の発現低下が原因で低酸素刺激によるアポトーシスを誘導できない事を報告してきた。本研究では乳腺でがん抑制因子として働いている事が明らかに成ったATF-2は、本来乳腺細胞でどの様な因子と複合体を形成しており、ストレス刺激で活性化された場合にその複合体がどのように変化するのかを明らかにしようと試みた。そこで、ヒト上皮細胞由来のHeLa細胞にFlag-HAタグを付けたATF-2及びATF-7遺伝子産物を発現させて、抗Flag抗体と抗HA抗体を用いて、それぞれの複合体を精製してMAS解析を行った。MAS解析の結果ATF-2はRb結合蛋白質やHDAC関連因子及びDNA-PKを含むクロマチン結合因子と、またATF-7はヒストンシャペロンやDNA-PKを含む因子等、これまでATF-2との関連が全く報告されていない多くの因子とそれぞれ複合体を形成している事が明らかに成った。ATF-2はRb結合タンパク質やHDAC関連因子と複合体を形成して、転写をポジティブに制御しているのに対して、ATF-7は逆にヘテロクロマチンの維持・形成に関与する因子と複合体を形成して転写をネガティブに制御している事が明らかに成った。また、ストレス刺激によってATF-7複合体が一旦解離する事も見出した。

此前，我们发现饲养一年以上的雌性ATF-2杂合子小鼠经常患乳腺癌，这表明ATF-2具有抑癌作用。使用DNA微阵列分析致癌机制的结果表明，ATF-2基因缺陷细胞由于Gadd45α和Maspin基因表达减少而不能通过缺氧刺激诱导细胞凋亡。在这项研究中，ATF-2被揭示为乳腺中的肿瘤抑制因子，它最初与乳腺细胞中的哪种因子形成复合物，当受到应激刺激激活时，我们试图阐明该复合物是如何形成的。变化。因此，我们在源自人上皮细胞的HeLa细胞中表达带有Flag-HA标签的ATF-2和ATF-7基因产物，并使用抗Flag和抗HA抗体进行纯化各自的复合物。 MAS 分析结果显示，ATF-2 与 Rb 结合蛋白、HDAC 相关因子和 DNA-PK 等染色质结合因子相关，ATF-7 与组蛋白伴侣和 DNA-PK 等因子相关。很明显，这些分子与许多以前未报道的因子形成复合物。 ATF-2 与 Rb 结合蛋白和 HDAC 相关因子形成复合物，以正向控制转录，而 ATF-7 则相反，与参与异染色质维持和形成的因子形成复合物，现已清楚，转录通过形成而受到负向调节。身体。我们还发现 ATF-7 复合物会因应激刺激而暂时解离。