Na^+,K^+/H^+交換輸送トランスポートソームの構造に基づく機能制御機構の解明

基于Na^+、K^+/H^+交换运输转运体结构阐明功能控制机制

基本信息

批准号：
18059020
负责人：
金澤浩
金额：
$ 5.7万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

哺乳類Na_+, H_+/K_+交換輸送体NHEには9種のアイソフォームが存在し、それぞれが一部異なる親水性ドメインを有している。この親水構造に相互作用しトランスポートソームを形成していると考えられ、この実態を明らかにすることが、特定領域の分担課題としての中心課題である。(1)昨年までの成果である単離したNHElに相互作用する因子CHP1の遺伝子を欠失した細胞を用いて欠失によっておこるNHE1の挙動を解析した。その結果、 CHP1との相互作用がNHElの基本構造をつくるのに必須であり、CHP1がないとERに留まり分解されることを確定した(AJP(2007)発表)。一方CHP1結合部位が欠失するとこの分解から免れることを新規に発見した(生化学会年回発表(2007),論文準備中)。このCHP結合部位が露出すると分解のシグナルになると予想され、今後の新展開が可能になった。トランスポートソームの機能の新規な側面を示す発見といえよう。(2)NHE6に相互作用する新規因子RACK1を単離するのに成功した。NHE6は細胞内小胞に局在することをすでに示していたが、新たに形質膜にも2割程度が存在し、内部と形質膜間を行き来することを発見した。形質膜への局在が、RACK1との相互作用で促進されることを新規に示し、トランスポートソームが局在制御単位である場合を示した点で極めて重要な成果である。(3)Na_+/H_+交換輸送体の機能と構造を明らかにするモデル系として細菌のNhaAについて研究した。膜表在性の12の領域の膜内在性部分の結合する意義について系統的に解析し、9つの表在性部分がNhaA分子の機能的構造形成に不可欠で有る一方3つの部分は切断可能であることを示した(Biochemisty(2007)発表)。上記の一連の研究成果を2つの総説として発表した.(生化学(2007)発表、Life(2008)印刷中)。

哺乳动物na_+，h _+/k_+交换传输信息nHe具有9种类型的同工型，每种类型的同工型都有一些不同的亲水域。人们认为，通过与这种亲水性结构进行互动而形成的运输，澄清实际情况是特定区域中的分离任务的核心任务。（1）通过缺失的细胞对丢失作用于分离的NHEL的CHP1基因的细胞（这是去年的结果）分析了NHE1的行为。结果，已经确定与CHP1的相互作用对于创建NHEL的基本结构至关重要，并且如果没有CHP1，它将在ER中阻止（AJP（2007））。另一方面，新发现的CHP1结合位点将逃离这种分解（诞生社会年（2007年），论文准备）。预计该CHP连接站点将成为分解的信号，并且将来可能会有新的发展。这是一个发现，指示了运输功能的新方面。（2）我们成功地隔离了与NHE6相互作用的新因子RACK1。 NHE6已经表明它将位于细胞内血管中，但发现大约有20％的转化剂在内部和转化之间传播。这是一个极为重要的成就，它表明转换的定位是通过与RACK1的相互作用来促进的，并且运输某些是局部控制单元。（3）na _+/h_+我研究了一种细菌，作为一个模型系统，阐明了替换运输的功能和结构。在NHAA分子的功能结构中，对于NHAA分子的功能结构是必不可少的，在NHAA分子的功能结构中，三个部分是必不可少的指示了一些东西（宣布的生化（2007））。以上一系列研究结果被发表为两种综合（生物化学（2007年），《生活》（2008年）。