RNAのポリA鎖伸長を介した染色体分配制御ネットワーク

RNA PolyA 链延长介导的染色体分离控制网络

• 批准号: 18058005
• 负责人: 中西 友子
• 金额: $ 3.2万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18058005/
• 关键词: mGLD-2; ポリA鎖伸長; ノックアウトマウス; 卵子; 細胞質; mRNA; ポリAポリメラーゼ; 卵子成熟

個体の発生・分化は、遺伝子発現を時空間的に制御することで正常に進行する。なかでも生殖細胞の分化においては、体細胞と異なり転写レベルでの調節に加え、翻訳レベルでの調節が遺伝子発現に大きく寄与している。我々はこれまでに、線虫やカエルの卵子でmRNAポリA鎖を伸長させるポリAポリメラーゼ(PAP)GLD-2のマウスホモログ(mGLD-2)に着目し、Mgld-2が細胞質でのポリA鎖付加に必須なCPSF160およびCPEBと協調してCyclinB1やMos MrnaなどのポリA鎖を伸長させることで、卵成熟の進行に必須な細胞周期関連タンパク質の翻訳を活性化していることを明らかにしてきた。そこで本年度は、作製したmGLD-2ホモ欠損マウス卵子の表現型について詳細に解析を行った。内在性および外来性mRNAを指標にポリA鎖伸長活性を検討した結果、ホモ欠損卵子ではヘテロ欠損卵子と比較して活性が低いものの有意な差を認めることはできなかった。このことを反映するように、ヘキスト33342を利用した細胞分裂過程の染色体分配や、胚発生速度のタイムラプス観察においても、ホモおよびヘテロ欠損卵子との間で違いはなかった。これらのことはmGLD-2のポリA鎖付加活性を補完する酵素の存在を示しており、卵子における減数分裂の進行が、複数個のPAPによる細胞周期関連タンパク質の翻訳活性化を介した複雑なネットワークで制御されていることが明らかとなった。

个体的发育和分化通过时空控制基因表达正常进行。其中，在生殖细胞的分化过程中，与体细胞不同，除了转录水平的调控外，翻译水平的调控对基因表达也有很大贡献。我们之前关注的是多聚腺苷酸聚合酶 (PAP) GLD-2 (mGLD-2) 的小鼠同源物，它可以延长线虫和青蛙卵中的 mRNA 多腺苷酸链，CyclinB1 和 Mos 与 CPSF160 和 CPEB 合作，而这对于链至关重要。添加。我们已经证明，mRNA 等 PolyA 链的延长会激活细胞周期相关蛋白的翻译，这对于卵母细胞成熟的进程至关重要。因此，今年，我们对我们生产的mGLD-2纯合小鼠卵母细胞的表型进行了详细分析。使用内源性和外源性mRNA作为指标检查polyA链延伸活性，结果显示，虽然与杂合性缺陷卵母细胞相比，纯合性缺陷型卵母细胞的活性较低，但没有观察到显着差异。作为对此的反映，使用 Hoechst 33342 对细胞分裂过程中的染色体分离和胚胎发育速度进行延时观察显示纯合子和杂合子卵母细胞之间没有差异。这些发现表明存在一种与 mGLD-2 的多聚腺苷酸链附加活性互补的酶，并且卵母细胞减数分裂的进展是由多个 PAP 介导的细胞周期相关蛋白的翻译激活介导的复杂过程。它是由网络控制的。

项目成果

Disruption of mouse poly(A) polymerase mGLD-2 does not alter polvadenvlation status in oocytes and somatic cells.

破坏小鼠多聚腺苷酸聚合酶 mGLD-2 不会改变卵母细胞和体细胞的多腺苷酸化状态。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Biochem. Biophys. Res. Commun. 364
• 作者: Nakanishi. T.;et. al.
• 通讯作者: et. al.