イトマキヒトデ卵母細胞ＭＩ停止解除時のｍＲＮＡポリＡ鎖伸長制御機構

海星卵母细胞 MI 阻滞释放后 mRNA 聚 A 链伸长的控制机制

基本信息

批准号：
13J10787
负责人：
越智洋絵
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Ochanomizu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13J10787/
关键词：
mRNA ポリA鎖伸長ウリジレーション卵母細胞ヒトデ

项目摘要

哺乳類培養細胞などでは mRNAの“短いポリA鎖”の末端がU化されることが報告されており、U化は“mRNA分解の目印”と考えられている。一方卵母細胞では“短いポリA鎖”をもつmRNAが貯蔵されており、時期特異的にそのポリA鎖が伸長され翻訳が活性化する。しかし卵におけるmRNAとU化との関係は全く明らかでなかった。そこで本研究ではこれに着目し「卵細胞のｻｲｸﾘﾝB mRNAがU化されており、U化RNAは全体分解を受けずにポリA化すること」を明らかにしてきた。すなわち卵細胞のmRNA U化は“mRNA分解目印”とは異なる機能をもつ可能性があり、さらなる詳細の究明が必要だった。そこで本年度は次の２つの課題に取り組んだ。【U化ｻｲｸﾘﾝB mRNAがポリA化される現象の詳細解明】ホルモン刺激前後の卵のｻｲｸﾘﾝB mRNAの動態と配列の詳細を調べたところ「U化mRNAの3’末は数塩基の部分的な分解(トリミング)を受け、続いてポリA化が起きる」ことが明らかとなった。ただしトリミングを受けずにポリA化するものも約1/3存在しており、トリミングはポリA化の必須要素ではないと考えられる。【卵細胞mRNA U化の網羅的解析】卵成熟過程におけるU化修飾の全体像を明らかにするため、次世代ｼｰｸｴﾝｼﾝｸﾞ用のサンプル調整法の検討そしてｼｰｸｴﾝｼﾝｸﾞ解析を行った。ホルモン刺激前の卵のmRNA3'末端配列について解析したところ、U化されるmRNAは数百種類存在することが明らかとなった。本研究ではU化mRNAには“分解経路”に加え、“翻訳へ利用される経路”が存在することを証明し、さらに網羅的解析によりその全体像の一端を明らかにすることに成功した。今後は3’末端トリミングの分子機構の解明や網羅的解析を進めることで、U化修飾の全体像を明らかにし、卵母細胞U化の生理学的意義の解明に迫ることが期待される。

据报道，在培养的哺乳动物细胞中对mRNA的“短多链链”的末端是U形成，U形成被认为是“ mRNA降解的标记”。另一方面，卵母细胞将mRNA储存带有较短的polya链的mRNA，并且Polya链专门扩展以激活翻译。但是，鸡蛋中mRNA与尿液化之间的关系根本不清楚。这项研究重点是这一点，并揭示了“卵细胞中的细胞周期蛋白B mRNA是U形成的，并且U形成的RNA变成多A形成，而无需全部降解。”换句话说，卵细胞的mRNA效率可能与“ mRNA降解标记”具有不同的功能，并且需要进一步详细的研究。因此，今年我们解决了以下两个问题：[当我们研究激素刺激之前和之后的蛋中蛋白B mRNA的动态和序列时，对U型蛋白酶B mRNA的现象进行了详细阐明，在激素刺激之前和之后，它表明“ unional the-mrna the-mrna base degogogogogogogogogogogogogue degogue degransion trime trimecy of trimecy'trimecy''但是，在不进行修剪的情况下，大约有三分之一的Polya被转换为Polya，并且修剪被认为是Polya的必不可少的元素。 [对U细胞mRNA Uization的综合分析]为了阐明在鸡蛋成熟过程中U型修饰的整体情况，我们研究了样本调整方法，用于下一代调味和进行调味分析。在激素刺激之前对卵的mRNA3'末端序列的分析表明，U形成了数百种类型的mRNA。在这项研究中，我们证明了U形成mRNA中的“降解途径”外，还有“翻译途径”，我们成功地通过全面的分析来阐明了整体情况的一部分。希望通过阐明3'末端修剪和全面分析的分子机制，可以阐明uization修饰的整体情况，并阐明卵母细胞效率的生理意义。