ヒストンメタボリズムとDECODE制御の分子基盤

组蛋白代谢和解码调控的分子基础

• 批准号: 18055009
• 负责人: 田上 英明
• 金额: $ 5.06万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18055009/
• 关键词: ピストン複合体; クロマチン制御; ヒストンメタボリズム; ヒストン複合体

本研究はヒストン複合体解析を通してクロマチン形成やエピジェネティック情報維持の詳細な分子機構,および遺伝子発現に伴うクロマチン制御の解明を目指したもので,平成19年度は以下の点を中心に解析を進めた。平成18年度までに,出芽酵母および分裂酵母からFLAG/HAエピトープタグを付加した各種ヒストンについて,生理的条件に近い低塩条件下でクロマチンに挿入されていない状態における複合体を精製することに成功している。特に,出芽酵母H2A-H2B複合体にはヒストンシャペロンNap1以外にクロマチン転写に関与するEACT(Spt16,Pob3)が含まれ,可溶性画分の多さからもダイナミックなピストンの交換がされることが示唆された。平成19年度は,このヒストンダイナミクスに関して,一過的な相互作用や弱い相互作用等を検出するためにホルムアルデヒドを利用したクロスリンク法を組み合わせた複合体精製法を試みた。この結果,従来の方法と異なる複合体が精製され,現在解析を進めているところである。新しいピストン相互作用因子ネットワークのスクリーニング法としてだけでなく,今後多面的な機能解析へと繋がることが期待される。また,分裂酵母ヒストンH3複合体の主要構成因子の1つとして同定したMlo2は大量発現により染色体分配異常を引き起こす機能不明のタンパク質であった。Mlo2がin vitroでヒストンH3/H4と結合することを確認し,現在結合部位の同定とその生理的意義についてヒストンメタボリズムと結びつけて解析を進めている。

这项研究旨在通过组蛋白复合物分析以及与基因表达相关的染色质控制，阐明染色质形成和表观遗传信息维持的详细分子机制，并在2007年，分析着重于以下几点。到2006年，从芽酵母和裂变酵母中添加的具有FLAG/HA表位标签的各种组蛋白已成功地将未插入染色质的状态下的络合物纯化为接近生理条件的染色质。特别是，除组蛋白伴侣NAP1外，发芽的酵母H2A-H2B复合物包含与染色质转录有关的EACT（ST16，POB3），并且大量可溶性分数表明动态活塞交换是可能的。在2007年，我们尝试了一种复杂的纯化方法，该方法使用甲醛结合了一种交联方法来检测瞬时相互作用和与该组蛋白动力学的弱相互作用。结果，与常规方法不同的复合物已被纯化，目前正在进行分析。希望它不仅将成为活塞相互作用因子网络的筛选方法，而且将来会导致多方面的功能分析。此外，MLO2被确定为裂变酵母组蛋白H3复合物的主要成分因子之一，它是一种功能不明的蛋白质，由于大量表达而导致染色体分布异常。我们已经确认MLO2在体外结合了组蛋白H3/H4，目前正在对组蛋白代谢的结合位点鉴定和生理意义进行分析。

项目成果

Protein tagging at rare codons is caused by tmRNA action at the 3' end of nonstop mRNA generated in response to ribosome stalling.

稀有密码子上的蛋白质标记是由响应核糖体停滞而生成的不间断 mRNA 3 端的 tmRNA 作用引起的。

• 发表时间: 2006
• 期刊: RNA 12
• 作者: Xia Li;Reiko Hirano;Hideaki Tagami;Hiroji Aiba
• 通讯作者: Hiroji Aiba

From the view of histone complexes : A sketch of molecular players on the chromatin assembly events.

从组蛋白复合物的角度来看：染色质组装事件中分子参与者的草图。

• 发表时间: 2006
• 期刊: DNA Structure, Chromatin and Gene Expression (Transworld Research Network) 37
• 作者: Yoshihiro Nakatani;Hideaki Tagami;Elena Shestakova;Hideaki Tagami
• 通讯作者: Hideaki Tagami

How is epigenetic information on chromatin inherited after DNA replication?

DNA复制后染色质的表观遗传信息如何遗传？

• 发表时间: 2006
• 期刊: The histone code and beyond (Ernst Schering Res Found Workshop) 57
• 作者: Yoshihiro Nakatani;Hideaki Tagami;Elena Shestakova
• 通讯作者: Elena Shestakova

An oncoprotein from the plant pathogen Agrobacterium has histone-chaperone-like activity

来自植物病原体农杆菌的癌蛋白具有组蛋白伴侣样活性

• 发表时间: 2007
• 期刊: Plant Cell 19
• 作者: Terakura S.;Ueno Y.;Tagami H.;Kitakura S.;Machida C.;Wabiko H.;Aiba H.;Otten L.;Tsukagoshi H.;Nakamura K.;Machida Y.
• 通讯作者: Machida Y.