αラクトアルブミン構造中間体の形成と細胞結合機能

α-乳清蛋白结构中间体的形成和细胞结合功能

基本信息

批准号：
18031002
负责人：
出村誠
金额：
$ 3.39万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18031002/
关键词：
NMR 立体構造タンパク質アポトーシス

项目摘要

リゾチーム・αラクトアルブミンのフォールディングに関する基礎データを活かし、水溶性タンパク質のフォールディング挙動と、その構造中間体が示す細胞膜結合機能との関連を分子レベルで解明することを目的としている。昨年度までに、新規複合体調製法の開発、酸処理法で得られた脂肪酸結合型αラクトアルブミンのアポトーシス誘導活性等に関する成果が得られ、今年度新たに以下の成果が得られた。(1)酸処理法と熱処理法で得られた脂肪酸結合型ウシαラクトアルブミンの生理的条件下での近紫外CDスペクトルは、オレイン酸濃度に依存して三次構造崩壊を示唆する楕円率低下が起こる。NMRでも脂肪酸結合型ウシαラクトアルブミンは非天然構造型スペクトルパターンを示した。脂肪酸結合型ウシαラクトアルブミンの1H NMRスペクトルおよび15N HSQCスペクトルでは、脂肪酸結合による化学シフト変化はαラクトアルブミンのαドメインで大きく、しかもβドメイン側に面するアミノ酸残基であることがわかった。(2)αβαの3つのドメインからなるヒトとウシ由来のαラクトアルブミン(HHHおよびBBB)のドメインを入れかえたキメラ体(HBB,BHB,BBH)との比較から、アポトーシス誘導に関与しているドメインについて考察した。熱処理法で得られたサンプルではMG状態での安定性とアポトーシス活性の強い相関があった。(3)αラクトアルブミンの天然構造の示す水溶性と基質選択性補因子機能は、Molten Globule様構造を酸性処理という簡便な方法で脂肪酸トラップすることができ、細胞死誘導活性という新規の生物機能に変換することができた。今後、αラクトアルブミンと脂肪酸による複合体のNMRキャラクタリゼーションをさらに詳細に検討することで、構造中間体のトラップとそのダイナミクス情報が得られると期待できる。

使用溶菌酶α-乳蛋白折叠的基本数据，目的是阐明水溶性蛋白的折叠行为与细胞膜结合功能之间的关系，其结构中间体在分子水平上表现出。到去年，对于开发了一种新的复杂制剂，以及通过酸治疗获得的脂肪酸结合α-乳脂蛋白的凋亡诱导活性获得的结果，今年获得了以下结果。（1）通过酸处理和在生理条件下的热处理方法获得的脂肪酸结合牛α-乳蛋白的近紫外CD光谱会导致椭圆时降低，表明第三纪结构衰减，取决于油酸浓度。脂肪酸结合的牛α-乳决定也表现出非天然结构化的光谱模式。在脂肪酸结合的牛α-乳糖蛋白的1H NMR和15N HSQC光谱中，发现由于脂肪酸结合而导致的化学位移变化在α-乳糖蛋白的α结构域中很大，并且是面临β结构域侧面的氨基酸残基。（2）通过比较已从人和牛来代替的嵌合体（HBB，BHB，BBH）来检查参与凋亡的诱导域（HBB，BHB，BBH）。通过热处理获得的样品显示出MG状态的稳定性与凋亡活性之间存在很强的相关性。（3）α-乳阳离子蛋白的自然结构的水溶性和底物选择性辅助功能能够以简单的方式（例如酸性处理）捕获脂肪酸，并转化为一种称为细胞死亡诱导活性的新型生物学功能。将来，可以进一步详细介绍与α-乳糖蛋白和脂肪酸的复合物的NMR表征，从而获得结构中间体及其动态信息的捕获。

项目成果

期刊论文数量（18）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

nteraction of the Halobacterial Transducer to a Halorhodopsin Mutant Engineered so as to Bind the Transducer: Cl-Circulation within the Extracellular Channel

盐细菌传感器与经过改造以结合传感器的盐视紫红质突变体的相互作用：细胞外通道内的 Cl 循环

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
Photochem. Photobiol. 83
影响因子：
0
作者：
C. Hasegawa;T. Kikukawa;S. Miyauchi;A. Seki;Y. Sudo;M. Kubo;M. Demura;N. Kamo
通讯作者：
N. Kamo

Differential Scanning Calorimetry of a Metalloprotein under Controlled Metal-Ion Activity

受控金属离子活性下金属蛋白的差示扫描量热法

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Protein J. 25(7-8)
影响因子：
0
作者：
Seki;S.;C.Hasegawa.;M.Shibata.;M.Yasui.
通讯作者：
M.Yasui.

Internal water molecules of the proton-pumping halorhodopsin in the presence of azide

叠氮化物存在下质子泵浦盐视紫红质的内部水分子

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
J.Am.Chem.Soc. 128
影响因子：
0
作者：
Lorenz Fonfria;Kandori;Mune da et al.
通讯作者：
Mune da et al.

イヌミルクリゾチームの物性解析に向けた安定化変異体の構築

用于犬乳溶菌酶物理性质分析的稳定突变体的构建

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
影响因子：
0
作者：
野中康宏;秋枝大介;神谷昌克;相沢智康;出村誠;河野敬
通讯作者：
河野敬

The solution structure of horseshoe crab antimicrobial peptide tachystatin B with an inhibitory cystine-knot motif

DOI：
10.1002/psc.846
发表时间：
2007-04-01
期刊：
JOURNAL OF PEPTIDE SCIENCE
影响因子：
2.1
作者：
Fujitani, Naoki;Kouno, Takahide;Kawano, Keiichi
通讯作者：
Kawano, Keiichi

DOI：
{{ item.doi }}
发表时间：
{{ item.publish_year }}
期刊：
{{ item.journal_name }}
影响因子：
{{ item.factor }}
作者：
{{ item.authors }}
通讯作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ journalArticles.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ monograph.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ sciAawards.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ conferencePapers.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ patent.updateTime }}

出村誠其他文献

ナノディスクを用いた膜タンパク質ハロロドプシンの機能解析

使用纳米圆盘对膜蛋白盐视紫红质进行功能分析

DOI：
发表时间：
2012
期刊：
影响因子：
0
作者：
山本愛弓;塚本卓;小橋川敬博; 内田毅;出村誠;稲垣冬彦;石森浩一郎
通讯作者：
石森浩一郎

有効性を発揮させるための剤形構築、皮膚浸透・経皮吸収に及ぼす剤形の影響

实现功效的剂型构建、剂型对皮肤渗透和透皮吸收的影响

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
日本香粧品学会誌 30
影响因子：
0
作者：
重村洋明;菊川峰志;宮内正二;出村誠;加茂直樹;菊川峰志;宮内正二;Takashi Kikukawa.;Seiji Miyauchi.;宮内正二;桑山健次;Seiji Miyauchi.;Kenji Kuwayama.;Seiji Miyauchi;Seiji Miyauchi.;Takashi Yamamoto.;宮内正二;菊川峰志;Seiji Miyauchi.;Takashi Kikukawa.;Seiji Miyauchi;Seiji Miyauchi.;宮内正二;山本崇;宮内正二;宮内正二;杉林堅次;杉林堅次
通讯作者：
杉林堅次

Halorhodopsin from Natronomonas Pharaonis (pHR) Is a Chloride Pump: Heterologous Expression of pHR in Xenopus Oocytes and Electrophysiological Characterization of Its Light-Driven Cl^- Pump

Natronomonas Pharaonis (pHR) 中的盐视紫红质 (pHR) 是一种氯离子泵：爪蟾卵母细胞中 pHR 的异源表达及其光驱动 Cl^- 泵的电生理学特征

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
影响因子：
0
作者：
重村洋明;菊川峰志;宮内正二;出村誠;加茂直樹;菊川峰志;宮内正二;Takashi Kikukawa.;Seiji Miyauchi.;宮内正二;桑山健次;Seiji Miyauchi.;Kenji Kuwayama.;Seiji Miyauchi
通讯作者：
Seiji Miyauchi

In vitro evolution of peptide aptamers against survivin from a novel three-finger scaffold library by cDNA display

通过 cDNA 展示从新型三指支架文库中体外进化抗存活蛋白肽适体

DOI：
发表时间：
2011
期刊：
影响因子：
0
作者：
日下部力;菊川峰志;神谷昌克; 相沢智康;河野敬一;井原邦夫; 加茂直樹;出村誠;Y. Yotsumoto,Y. Mochizuki,M. Suzuki,K. Nishigaki,N. Nemoto
通讯作者：
Y. Yotsumoto,Y. Mochizuki,M. Suzuki,K. Nishigaki,N. Nemoto