老化に特異な新規構造体Rubisco-containing bodyの特性解析

含 Rubisco 体的表征，这是一种独特的衰老结构

基本信息

批准号：
17051002
负责人：
前忠彦
金额：
$ 3.84万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17051002/
关键词：
シロイヌナズナ Rubisco Rubisco-containing body 老化オートファジー

项目摘要

葉緑体ストロマにターゲットされるGFPやDsRedを発現するシロイヌナズナ(CT-GFP,CT-DsRed)の緑葉を用いて、RCBの生細胞における可視化法について検討した。葉を個体から切離後、コンカナマイシンAあるいはE-64dを浸透させインキュベートすると、処理後10時間あたりからGFP蛍光をもつ小胞が液胞内に蓄積した。またCT-DsRedでも同様の結果が得られた。これらの小胞は直径が1μm前後でクロロフィルの自家蛍光を持たないなど、電顕におけるRCB像とよく似た特徴を有していた。抗GFP抗体及び抗RbcL (Rubisco-lATGe subunit)抗体を用いた二重免疫電顕による解析の結果、GFP小胞がRCBであることが確認された。このRCBの生細胞における可視化法を用いて、RCBの蓄積とオートファジー機構との関連性について調べた。その結果、オートファジーに必須の遺伝子ATGの欠損変異体(atg5-1)では、RCBの蓄積は全く見られないことがわかった。その代わりに、atg5-1では飢餓条件下でのインキュベート後、葉肉細胞において葉緑体から突出する管状の構造体、ストロミュールが出現していた。次にCT-DsRedとautophagosomeやautophagic bodyのマーカーであるGFP-ATG8aを共発現する形質転換体を用いて蛍光2重染色による解析を行った。阻害剤の存在下でインキュベートした葉では、CT-DsRedが葉緑体に加えて、液胞に存在するGFP-ATG8aで可視化された小胞、すなわちautophagic bodyにも局在することがわかった。またGFP-ATG8は稀に観察される短い球状のストロミュールにも局在していた。これらの結果から、RCBの蓄積はATGに依存したオートファジー機構により進行していることが示された。

我们使用拟南芥（CT-GFP，CT-DSRED）的绿色叶片研究了RCB的可视化，该叶子表达了由叶绿体基质靶向的GFP和DSRED。将叶子与个体切开后，将它们与康卡纳霉素A或E-64D一起孵育，并在治疗后大约10小时内积聚在液泡中的GFP荧光。 CT-DSRED也获得了类似的结果。这些囊泡具有与电子显微镜中的RCB图像相似的特征，例如直径约为1μm，没有叶绿素自动荧光。使用抗GFP抗体和抗RBCL（Rubisco-Latge亚基）抗体通过双重免疫电子显微镜分析证实GFP囊泡是RCB。 RCB在活细胞中的这种可视化方法用于研究RCB积累与自噬机制之间的关联。结果表明，在ATG的突变体（ATG5-1）中未观察到RCB的积累，ATG是一种缺乏的基因，这对于自噬是必不可少的。取而代之的是，在ATG5-1中，在饥饿条件下孵育后，叶绿体细胞中出现了从叶绿体伸出的管状结构。接下来，使用与自噬体和自噬体标记物GFP-ATG8A共表达CT-DSRED的转化体CT-DSRED进行了双荧光染色进行分析。在抑制剂存在下孵育的叶片中，发现CT-DSRED除了叶绿体以及用液泡中存在的GFP-ATG8A可视化的囊泡外定位，即自噬体。 GFP-ATG8也位于很少观察到的短基stro子中。这些结果表明，RCB的积累通过ATG依赖性自噬机制进行。

项目成果

期刊论文数量（5）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Effects of nitrogen nutrition on the relationships between the levels of rbcS and rbcL mRNAs and the amount of ribulose 1・5-bisphosphate carboxylase/oxygenase synthesized in the eighth legve of rice from emergence through senescence

氮素营养对水稻第八穗出苗至衰老rbcS、rbcL mRNA水平与核酮糖1·5-二磷酸羧化酶/加氧酶合成量关系的影响

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Plant Cell Environ., 28
影响因子：
0
作者：
Imai;K.;Suzuki;Y.;Makino A;Mae T.
通讯作者：
Mae T.

In vivo fragmentation of the large subunit of ribulose-1,5-bisphoshate carboxylase by reactive oxygen species in an intact leaf of cucumber under chilling-light conditions.

在冷光条件下完整黄瓜叶中活性氧对核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶大亚基的体内断裂。

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Plant Cell Physiol., 47(印刷中)
影响因子：
0
作者：
Nakano;R.;Ishida;H.;Makino;A.;Mae;T.
通讯作者：
T.

地球生物をささえるルビスコ

Rubisco 支持地球上的生物

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Journal of Germfree Life and Gnotebiology 36・1
影响因子：
0
作者：
Nakano;R.;矢田佳織;前忠彦
通讯作者：
前忠彦

Increased Rubisco Content in Transgenic Rice Transformed with "Sense" rbcS Gene

用“正义”rbcS 基因转化的转基因水稻中 Rubisco 含量增加

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
Plant Cell Physiol. 48(印刷中)
影响因子：
0
作者：
Suzuki;Y.
通讯作者：
Y.

DOI：
{{ item.doi }}
发表时间：
{{ item.publish_year }}
期刊：
{{ item.journal_name }}
影响因子：
{{ item.factor }}
作者：
{{ item.authors }}
通讯作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ journalArticles.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ monograph.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ sciAawards.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ conferencePapers.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ patent.updateTime }}

前忠彦其他文献

アワノメイガのメスによるオスの求愛歌とコウモリの反響定位音の認識

雌性玉米螟对雄性求爱歌曲和蝙蝠回声定位声音的识别

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
日本音響学界聴覚研究会資料 37
影响因子：
0
作者：
Mae;T.;前忠彦;Tadahiko Mae;金田吉弘;中野・石川・田付・Surlykke・Skals・小池・吉田・丸山・高梨
通讯作者：
中野・石川・田付・Surlykke・Skals・小池・吉田・丸山・高梨

Identifying the map representation in crime maps and its effect on viewer's perception

识别犯罪地图中的地图表示及其对查看者的影响

DOI：
10.11361/journalcpij.55.385
发表时间：
2020
期刊：
Journal of the City Planning Institute of Japan
影响因子：
0
作者：
尹棟敬;石山敬貴;菅波眞央;香川昂亮;渡邊まり;伊丸岡芹菜;小倉真紀;田副雄士;石田宏幸;鈴木雄二;小原実広;前忠彦;牧野周;山根万由子・雨宮護・白川真裕・大山智也・島田貴仁
通讯作者：
山根万由子・雨宮護・白川真裕・大山智也・島田貴仁

超多収性と高い窒素生産効率を併せ持つ大粒イネ"秋田63号"の特性解析

兼具超高产量和高氮肥效率的大粒稻“秋田63号”特性分析

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
影响因子：
0
作者：
Mae;T.;前忠彦
通讯作者：
前忠彦

遺伝子組換え作物専用隔離ほ場におけるRubisco過剰生産イネの収量、光合成の解析

转基因作物隔离田中 Rubisco 过量生产水稻的产量和光合作用分析

DOI：
发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
0
作者：
菅波眞央;尹棟敬;渡邊まり;伊丸岡芹菜;小倉真紀;石山敬貴;田副雄士;鈴木雄二;前忠彦;牧野周
通讯作者：
牧野周

旧志免鉱業所竪坑櫓に関する調査　―その 2　かぶりコンクリートの剥落傾向―

原石门矿厂竖井转塔调查-第2部分：保护层混凝土剥落趋势-

DOI：
发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
0
作者：
尹棟敬;香川昂亮;石山敬貴;菅波眞央;前忠彦;鈴木雄二;石田宏幸;小原実広;牧野周;スカイティン，今本啓一，野口貴文，兼松学，濱崎仁，寺西浩司，清原千鶴，山田宗範
通讯作者：
スカイティン，今本啓一，野口貴文，兼松学，濱崎仁，寺西浩司，清原千鶴，山田宗範