ヘパラナーゼの局在化によるヘパラン硫酸分解活性の制御と生体内の細胞交通の制御

通过乙酰肝素酶的定位控制体内硫酸乙酰肝素降解活性和细胞交通

基本信息

批准号：
17046002
负责人：
東伸昭
金额：
$ 3.07万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

免疫細胞におけるヘパラン硫酸、ヘパリンなどグリコサミノグリカンの分解は、血管外浸潤の調節、生理活性物質の切り出しや貯蔵などを通じて生物現象の制御に関与すると考えられるが、その詳細はわかっていない。ヘパラナーゼの多様な分子種とその活性に着目し、主にマスト細胞を題材にその細胞内分布と機能を検討した。マスト細胞にヘパラナーゼが高発現することを昨年度に見出した。今年度は種々のマスト細胞について発現を検討した。結合組織型マスト細胞には共通して強い発現が認められたが、粘膜型マスト細胞には検出されなかった。これはin vitroのマスト細胞の分化誘導培養系でも確認された。結合組織型マスト細胞はヘパリンを合成、蓄積するが、ヘパラナーゼの発現がこのヘパリンの発現に相関すると考えられた。マスト細胞株が外因性の前駆体ヘパラナーゼを取り込み顆粒内に蓄積すること、この過程でプロセシングによりヘパラナーゼを活1生型に変換すること、この結果生じる顆粒内ヘパリンの低分子化が顆粒内プロテアーゼの活性増強と相関することを見出した。ヘパラナーゼが顆粒内プロテアーゼの調節因子であるヘパリンを低分子化することにより、その活性調節に関与すること、つまりマスト細胞が顆粒内に保持する個々のエフェクター分子の活性を転写非依存的かつ包括的に支配する可能性のある分子であることを示した。ヘパラナーゼのプロセシングを細胞内で検出する系の確立を目指した。昨年度の抗ヘパラナーゼモノクローナル抗体のエピトープ解析結果を受け、種々の細胞における内在性ヘパラナーゼの細胞内分布を検討した。マスト細胞などの免疫細胞とメラノーマ、大腸がん細胞などのがん細胞の間で、複数のモノクローナル抗体に対する反応性の強弱が異なることを見出した。両細胞が異なる分子種を含む可能性を考え、生化学的な裏付けを試みている。

通过调节血管浸润，切割和储存生理物质等的解释，诸如免疫细胞中肝素硫酸和肝素等糖胺仪的分解被认为参与了生物学现象的控制，但尚不清楚。为了关注多种熔融物种及其活性，我们主要研究了主要用于肥大细胞的细胞内分布和功能。去年，我发现肝素酶在肥大细胞中会很高。今年，我们检查了各种肥大细胞。通常在关节组织肥大细胞中发现了强表达，但未被粘膜肥大细胞检测到。这也被证实在体外的肥大细胞分化诱导的培养系统。结合的组织肥大细胞积聚并积累肝素，但据认为，肝素酶的表达与肝素的表达相关。肥大的细胞库存在颗粒中吸收并积累了外部前体肝素酶，在此过程中，肝素酶通过加工转化为一种疗法，以及颗粒中颗粒颗粒中颗粒颗粒中颗粒颗粒的分子还原。与活动。肝酶参与活性控制，即通过降低肝素的分子（颗粒的调节因子）中颗粒中颗粒的调节因子，这可能是颗粒中的分子。。目的是建立一个检测细胞中肝素酶加工的系统。在去年对抗副酶单克隆抗体的表位分析之后，我们检查了各种细胞中乙酰丙烷酶的细胞内分布。它发现免疫细胞（例如肥大细胞和癌细胞）的反应性（例如黑色素瘤和结直肠癌细胞）对多种单色抗体具有不同的反应性。考虑到包含不同类型的分子的可能性，两种细胞都试图支持生化物。