発がんにおけるユビキチンリガーゼCdc4/Fbw7基質分子の役割

泛素连接酶 Cdc4/Fbw7 底物分子在癌变中的作用

基本信息

批准号：
17014007
负责人：
中山啓子
金额：
$ 4.48万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17014007/
关键词：
Cdc4 Nocth c-Myc ノックアウトマウス

项目摘要

F-boxタンパク質Cdc4は、Skp1、Cul-1、Rbx1とともにSCF複合体を構成し、ユビキチンリガーゼとして機能すると考えられている。われわれが作製したCdc4ノックアウトマウスは、Notch-4の異常蓄積による血管形成異常が起こり、胎生10.5日目で死亡した。このことは、胎生期における生理的かつ冗長性を示さない基質分子はNotch-4であると結論された。Tリンパ球特異的にCdc4を欠損するコンディショナルノックアウトマウスを作製し、T細胞分化過程をCD4およびCD8の発現パターンから解析したところ、分化の中間段階であり、CD4/CD8いずれもが発現し、正の選択・負の選択が行われるステージの細胞が野生型に比べ有意に増加していることが判明した。このステージでは通常増殖を停止しるが、Cdc4ノックアウトT細胞では激しい増殖がこのステージでも認められ、過剰増殖がこの細胞群の増加の原因であると考えられた。また、生後8週以降よりリンパ腫の発症が認められ、Cdc4は当初報告されたとおり、がん抑制遺伝子として機能していることが裏付けられた。このような過剰増殖しているリンパ球の生化学的解析では、Notchファミリーとc-Mycの過剰な蓄積が観察された。そこでNotchが転写因子として働く際の共同因子であるRBP-JκノックアウトマウスとCdc4ノックアウトマウスを交配した。このマウスはNotchシグナルが欠失し、かつc-Mycが蓄積している環境を作製することとなり、それらの分子のTリンパ球増殖の効果を調べたところ、このようなTリンパ球でも異常増殖が見られた。このことからCdc4ノックアウトTリンパ球はc-Mycの過剰蓄積により異常な増殖をきたし癌化が誘導されていると結論した。

F-box蛋白Cdc4与Skp1、Cul-1和Rbx1一起构成SCF复合物，并且被认为具有泛素连接酶的功能。我们创建的 Cdc4 敲除小鼠由于 Notch-4 的异常积累而出现异常的血管生成，并在胚胎第 10.5 天死亡。由此得出Notch-4是胚胎时期生理的、非冗余的底物分子的结论。我们制作了T淋巴细胞中特异缺乏Cdc4的条件敲除小鼠，从CD4和CD8的表达模式分析了T细胞的分化过程。我们发现它们处于分化中期，CD4和CD8都有表达。结果发现，正、负选择阶段的细胞数量较野生型显着增加。通常情况下，增殖在这个阶段停止，但在Cdc4敲除T细胞中即使在这个阶段也观察到强烈的增殖，这表明过度增殖是该细胞群增加的原因。此外，8周龄后观察到淋巴瘤的发病，证实了Cdc4作为肿瘤抑制基因的功能，正如最初报道的那样。对这些过度增殖的淋巴细胞的生化分析显示，Notch 家族成员和 c-Myc 过度积累。因此，我们将 RBP-Jκ 敲除小鼠（Notch 作为转录因子时的辅助因子）与 Cdc4 敲除小鼠进行杂交。在这只小鼠中，我们创造了一个Notch信号被删除、c-Myc积累的环境，当我们研究这些分子对T淋巴细胞增殖的影响时，我们发现即使这样的T淋巴细胞也出现异常增殖。由此，我们得出结论，Cdc4敲除的T淋巴细胞由于c-Myc的过度积累而发生异常增殖，并被诱导癌变。