サイクリンEとMycの分解に関与するユビキチンリガーゼCdc4の発癌に果たす役割

泛素连接酶 Cdc4 参与细胞周期蛋白 E 和 Myc 降解在肿瘤发生中的作用

基本信息

批准号：
16022204
负责人：
中山啓子
金额：
$ 4.29万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16022204/
关键词：
F-boxタンパク質 Cdc4 サイクリンE Notch-4 c-Myc ユビキチンリガーゼ

项目摘要

F-boxタンパク質Cdc4は、Skp1、Cu1-1、Rbx1とともにSCF複合体を構成し、ユビキチンリガーゼとして機能すると考えられている。Cdc4は当初サイクリンEのユビキチンリガーゼとして報告されたが、われわれが作製したノックアウトマウスでは、サイクリンEの蓄積は認められずむしろNotch-4の異常蓄積による血管形成異常が認められた。培養細胞を用いたでは、Cdc4はc-Mycにリン酸化依存的に結合し、Cdc4の過剰発現ではc-Mycタンパクの半減期を減少させ、逆にsiRNAiによるノックダウンでは半減期を増加させた。また、Cdc4のSkp1結合部位であるF-boxに変異を導入したCdc4は、c-Mycの半減期を延長した。このようなことから、Cdc4は、c-Mycのユビキチンリガーゼとして働いていることが判明した。一方、Tリンパ球特異的にCdc4を欠損するコンディショナルノックアウトマウスを作製したところ、T細胞の分化については明らかな異常は認めなかったが、末梢のリンパ組織において、増殖障害があり末梢のTリンパ球は抗原刺激に対して応答性が低下していた。また、コンディショナルノックアウトマウスから調製した胎児線維芽細胞においてin vitroでCdc4遺伝子を不活化すると、著しい増殖障害が見られた。生化学的な結果より、c-Mycの過剰蓄積によって、アポトーシスが誘導されている可能性が示唆される。

F-box蛋白Cdc4与Skp1、Cu1-1和Rbx1一起构成SCF复合物，并且被认为具有泛素连接酶的功能。 Cdc4最初被报道为cyclin E的泛素连接酶，但在我们产生的敲除小鼠中，没有观察到cyclin E的积累，而是观察到由于Notch-4异常积累而导致的异常血管生成。在培养的细胞中，Cdc4 以磷酸化依赖性方式与 c-Myc 结合，Cdc4 的过度表达会缩短 c-Myc 蛋白的半衰期，而 siRNAi 的敲低则会增加半衰期。此外，Cdc4在F-box（Cdc4的Skp1结合位点）中引入了突变，延长了c-Myc的半衰期。这些结果表明 Cdc4 具有 c-Myc 泛素连接酶的功能。另一方面，当我们产生T淋巴细胞中特异性缺乏Cdc4的条件敲除小鼠时，没有观察到T细胞分化的明显异常，但外周淋巴组织存在增殖缺陷，外周T淋巴细胞球体的反应性降低。抗原刺激。此外，当条件敲除小鼠制备的胎儿成纤维细胞中的Cdc4基因在体外失活时，观察到显着的生长缺陷。生化结果表明c-Myc的过度积累可能会诱导细胞凋亡。

项目成果

期刊论文数量（30）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Early embryonic death in mice lacking the beta-catenin-binding protein Duplin.

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Molecular and cellular biology
影响因子：
5.3
作者：
Masaaki Nishiyama;K. Nakayama;R. Tsunematsu;T. Tsukiyama;A. Kikuchi;K. Nakayama
通讯作者：
Masaaki Nishiyama;K. Nakayama;R. Tsunematsu;T. Tsukiyama;A. Kikuchi;K. Nakayama

Molecular dissection of the interaction between p27 and KPC, the ubiquitinligase that regulates proteolysis of p27 in G1 phase.

p27 和 KPC 之间相互作用的分子剖析，KPC 是调节 G1 期 p27 蛋白水解的泛素连接酶。