立体構造から探るフェレドキシン依存性循環電子伝達でのチトクロムb_6f複合体の役割

从三维结构研究细胞色素b_6f复合物在铁氧还蛋白依赖性循环电子转移中的作用

基本信息

批准号：
16048217
负责人：
栗栖源嗣
金额：
$ 2.3万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

チトクロムb_6f複合体は、葉緑体のチラコイド膜中に存在し、2量体あたり16個のサブユニットによって構成される分子量22万の超分子複合体である。高等植物ではチラコイド膜のストローマ側にフェレドキシン(Fd)-NADP^+還元酵素(FNR)がサブユニットとして結合していることがわかっていたため、界面活性剤で可溶化したホウレン草のb_6f複合体を用いて、Fdをセファロース樹脂に固定したFd-カラムによる相互作用解析を行ったところ、FdとFNR : b_6f複合体の間の相互作用は非常に弱く、ストローマ空間に存在するFNRとは明らかに違う親和性を示した。b_6f複合体上に結合したFNRと、ストローマ空間に存在するFNRとの間にFdに対する相互作用の違いが見られた為、ゲノム情報が豊富なトウモロコシの葉を用いてマススペクトル解析を行ったところ、トウモロコシFNRには3種の分子種(FNR1,FNR2,FNR3)が存在し、FNR1とFNR2が膜に結合した状態で、FNR3はストローマに可溶性状態で存在していることが判明した。つまり、チトクロムb_6f複合体と結合しているのはFNR1とFNR2アイソザイムで、FNR3アイソザイムは単独でストローマに局在し、チトクロムb_6f複合体はFNRの特定の分子種(FNR1とFNR2)を介してFdと相互作用していることを突き止めた。複合体状態のFNR1と大腸菌で発現させた組換え体FNR1とでは、Fd-カラムからの溶出パターンに大きな違いが見られるので、b_6f複合体と結合するFNR1に何らかの翻訳後修飾が存在する可能性も示唆される。

Chitochrome B_6F复合物是一种超分子络合物，分子量为220,000，在氯环锥形膜中发现，由每两个量的16个亚单位的分子量组成。在较高的植物中，发现Ferleedoxin（FD）-NADP^+还原酶（FNR）是在铁蛋白酶膜的纵向侧的亚基，因此使用Spiny Grass B_6F溶解在FD--溶解的情况下。柱分析是通过FD柱进行的，FD和FNR：B_6F复合物之间的相互作用非常弱，并且显然与Straman空间中的FNR不同。由于与B_6F复合物的FNR键与FNR之间的相互作用差异，因此使用具有丰富基因组信息的玉米叶进行了质谱分析。分子物种（FNR1，FNR2，FNR3），并且FNR1和FNR2与膜结合，并且FNR3在Straman中存在于可溶性状态。换句话说，FNR1和FNR2同工酶与Chitochrome B_6F复合物相连，FNR3同工酶单独位于培养皿中，而Chitochrome B_6F复合物是通过特定的分子物种（FNR1和FNR2）进行的。与。由于复杂的FNR1和重组FNR1在epidacios中表达，因此在FD柱上的洗脱模式有很大的差异，因此FNR1之后的某些翻译与B_6F复合物相结合建议。

项目成果

期刊论文数量（11）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

A Structural basis of Equisetum arvense Ferredoxin isoform II producing an altemative electron transfer with Ferredoxin-NADP+ reductase

木贼铁氧还蛋白亚型 II 与铁氧还蛋白-NADP 还原酶产生替代电子转移的结构基础

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Journal of Biological Chemistry 280
影响因子：
0
作者：
G.Kuris;D.Nishiyama;M.Kusunoki;S.Fujikawa;M.Katoh;G.T.Hanke;T.Hase;K.Teshima
通讯作者：
K.Teshima

立体構造をもとに考えるシトクロムb_6f複合体の光合成電子伝達

基于3D结构的细胞色素b_6f复合物的光合电子转移