Rap1/RAPLによる抗原提示細胞DCの免疫監視調節機構の解明

Rap1/RAPL阐明抗原呈递DC的免疫监视调节机制

基本信息

批准号：
16043227
负责人：
片桐晃子
金额：
$ 3.14万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

活発な生体内移動をしながら免疫応答を制御する樹状細胞の、遊走の分子基盤は明かとなっていない。低分子量G蛋白質Rap1の下流標的分子RAPLが、樹状細胞に多く発現することを見い出したので、Rap1活性化及びRAPLが樹状細胞におけるケモカインを介する接着及び遊走に関与するかどうかをin vitroで検討するとともに、生体内において、樹状細胞のランゲルハンス細胞の定常状態及び炎症時における所属リンパ節への移動を解析した。正常DCをフィブロネクチン上でケモカイン刺激すると速やかに接着し一極にラッフル膜を形成し移動を開始するが、RAPL欠損DC、Rap1活性抑制分子Spa-1発現DCをケモカイン刺激すると、むしろ浮き上がってくることが判明した。樹状細胞においてもケモカインを介する接着及び遊走は、Rap1及びRAPLに依存していることが判明した。表面リンパ節のサブセット解析によって、CD11c陽性Langerin陽性細胞が低下していることから、定常状態での樹状細胞の移動能力が低下していることが判明した。また炎症時の遊走を調べるため、皮膚にFITCを塗布し、所属リンパ節におけるFITCを取り込んだIa強陽性の皮膚由来のDC数を調べたところ、正常マウスに比べ、顕著な低下が認められた。このことから、Rap1活性化及びRAPLは樹状細胞の生体内での移動にも重要であることが明かとなった。

树突状细胞在体内主动迁移时控制免疫反应，其迁移的分子基础尚不清楚。我们发现低分子量G蛋白Rap1的下游靶分子RAPL在树突状细胞中高表达。我们在体外研究了Rap1激活和RAPL是否参与了树突状细胞中趋化因子介导的粘附和迁移。此外，我们分析了树突状细胞在稳态和体内炎症期间向区域淋巴结的运动。当正常的 DC 受到纤连蛋白上的趋化因子刺激时，它们会迅速相互粘附，在一个极形成褶皱膜，并开始迁移，但是，当 RAPL 缺陷的 DC 或表达 Spa-1（抑制 Rap1 活性）的 DC 被破坏时。事实证明，在趋化因子的刺激下，它们实际上会漂浮起来。还发现趋化因子介导的树突状细胞粘附和迁移依赖于 Rap1 和 RAPL。浅表淋巴结亚组分析显示CD11c阳性Langerin阳性细胞数量减少，表明树突状细胞稳态迁移能力下降。此外，为了研究炎症期间的迁移，将FITC涂在皮肤上，检查区域淋巴结中摄取FITC的Ia阳性皮肤源性DC的数量，与正常小鼠相比，观察到显着减少。这些结果表明 Rap1 激活和 RAPL 对于体内树突状细胞迁移也很重要。