転写因子の欠損に起因する発がんにおける基本転写因子の役割と核内シグナル伝達機構

基础转录因子及核信号转导机制在转录因子缺陷癌变中的作用

基本信息

批准号：
14028035
负责人：
大熊芳明
金额：
$ 4.22万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.ヒトTFIIEαのZnフィンガー領域の構造解析ヒト基本転写因子TFIIEはαとβサブユニットがα2β2の4量体を形成し、転写開始と伸長への移行に機能する。αは中央コア領域にZnフィンガーモチーフを有しており、この欠失変異体は試験管内転写系においてドミナントネガティブとして機能することから、転写に重要と考えられる。さらに真正細菌と真核生物の中間に位置する古細菌にもZnフィンガー領域を含むTFIIEαのN末端相当領域だけが保存されていることが示され、種を越えた機能の重要性が考えられている。そこで我々は、この領域をNMR構造解析し、亜鉛を配位するZnフィンガーモチーフであること、DNA結合型の従来のものと異なり表面は負電荷を帯びて蛋白相互作用に重要な役割を持つことを明らかにした。2.RNAポリメラーゼII(PolII)の転写開始から伸長への移行段階の解析TFIIEβサブユニットC末端ヘリックス領域に点変異を入れると、直鎖状DNA鋳型によるTFIIEの転写活性が失われた。これら変異は、TFIIHによるPolIICTDのリン酸化活性の促進能も失っていた。以上から、この領域は転写伸長への移行活性に関与すると考えられる。その機能メカニズムは、さらに検討中であるがTFIIHの転写伸長への移行に寄与するp44サブユニットとの結合が変異体では野生型より強くなっていたため、TFIIHとの作用の変化が寄与していると考えられる。3.ヌクレオチド除去修復因子XPCの修復反応におけるTFIIHとの相互作用紫外線等によるDNAの損傷の結果生じる皮膚癌を防ぐ損傷修復反応に関与する因子XPCは、遺伝病の色素性乾皮症原因因子で、損傷部位を認識して修復反応の引き金を引く因子であることを我々は明らかにしている。今回、XPCがそのC末端でTFIIHと結合することが修復活性においても大変重要であることを示した。

1。人TFIIEα人类基本转录因子TFIIE的Zn手指区域的结构分析形成了α和β亚基进入α2β2的四聚体，并在转录和向伸长的转变中起作用。 α在中心核心区域具有锌指基序，并且该缺失突变体在体外转录系统中起主要负面的作用，被认为对转录很重要。此外，已经表明，在包括锌指区域在内的TFIIEα的N末端当量区域在古细菌中保守，位于真核生物和真核生物之间的一半，并且人们认为功能在物种之间的重要性。因此，我们通过NMR结构分析了该区域，并揭示了它是Zn指的基序，可以协调锌，并且与常规的DNA结合类型不同，表面具有负电荷，并且在蛋白质相互作用中具有重要作用。 2。分析从转录启动到RNA聚合酶II（polii）扩展的过渡阶段，当将点突变放置在TFIIEβ亚基的C末端螺旋区域时，丢失了线性DNA模板TFIIE的转录活性。这些突变还失去了TFIIH促进poliictd磷酸化活性的能力。从以上，可以认为该区域参与转录伸长的过渡活动。功能机制正在进一步研究中，但是由于与p44亚基的结合有助于TFIIH向转录伸长的过渡，因此在突变体中比野生型中的延伸更强，因此人们认为与TFIIH作用的变化有助于。 3。核苷酸切除修复因子与TFIIH的相互作用在XPC因子的修复反应中的相互作用，涉及损伤修复反应的XPC因子，以防止由紫外线射线引起的DNA损伤引起的皮肤癌等。XPC是负责遗传性疾病的皮肤色素的因素，并且是识别损害和损害的因素。这次，我们已经表明，XPC与TFIIH结合在其C末端以及修复活性非常重要。