ラージGタンパク質シグナル系の遺伝子異常と発癌機構

大G蛋白信号系统的遗传异常与致癌机制

基本信息

批准号：
14026037
负责人：
森正樹
金额：
$ 4.03万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14026037/
关键词：
G-protein Gγ7 肝癌胆管細胞癌 DNAマイクロアレイ細胞周期関連遺伝子 p27

项目摘要

【目的】我々は膵癌においてDifferential display法を用い、癌部で発現が抑制される癌関連遺伝子としてG-protein γ7(Gγ7)を同定した(BBRC.246,1998)。Gγ7は三量体G蛋白で、細胞外シグナルの細胞内への伝達に関与する。これまで食道癌、胃癌、大腸癌においてもその発現の減弱を確認したが(Cancer Res.59,1999)、当研究では原発性肝癌におけるGγ7発現を解析し臨床病理学的意義を検討するとともにGγ7遺伝子導入細胞を用いたDNAマイクロアレイ解析を行った。【対象と方法】(1)肝癌細胞株(HuH7,HepG2)と原発性肝癌切除51例(肝細胞癌35例、胆管細胞癌16例)の癌部(T)及び非癌部(N)におけるGγ7の発現を解析した。臨床病理学的因子(術前肝機能を含む背景因子と腫瘍因子)との相関をT/N比の中央値にて2群に分け比較検討した。(2)G protein γ7遺伝子発現が減弱している癌細胞株(KY150)にmock遺伝子とG protein γ7遺伝子を導入し、マイクロアレイ法を用いて遺伝子発現の比較を行った。【結果】(1)1.Gγ7遺伝子発現:HuH7、HepG2ともに明らかなGγ7の発現を認めた。肝細胞癌におけるT/N比は1.1±1.2(中央値:0.81)であり、他の消化器癌と異なり癌部での発現減弱は認めなかった。一方、胆管細胞癌におけるT/N比は0.55±0.35(中央値:0.44)で、T/N比1.0以上は16例中1例のみであり、癌部での明らかな発現減弱を認めた。2.臨床病理学的検討:肝細胞癌では、いずれの臨床病理学的因子においてもGγ7の発現との間に有意な相関は見られなかった。一方、胆管細胞癌では、高度減弱群は、軽度減弱群と比べ、ICGR15が有意に低値であった(8.7±2.4vs.16.6±3.1%,P<0.01)。また、高度減弱群の全8例が中・低分化型または低分化型と低分化型を含むのに対し、軽度減弱群では低分化型を含むのは3例のみであった(8/8vs.3/8,P<0.01)。しかし、im, ly, v, pn因子など他の病理学的因子やリンパ節転移では両群間に有意差を認めなかった。(2)DNAマイクロアレイ解析ではp27,TTK protein kinase, INK4cといった細胞周期関連遺伝子の増強を認めた。【総括】1.肝細胞癌では癌部での発現減弱は認めなかったが、胆管細胞癌では他の消化器癌と同様、癌部での明らかな発現減弱を認めた。株化細胞に関しても、膵癌や消化管癌ではGγ7はほとんど発現しないが、肝癌細胞株では明らかな発現を認めた。2.胆管細胞癌では、癌部での高度発現減弱例において、術前肝機能が良好であり、低分化型の症例が多かった。(2)DNAマイクロアレイ解析によりGγ7の発現によりp27,TTK protein kinase, INK4cといった細胞周期関連遺伝子の増強を認めた。

[目的] 利用胰腺癌的差异显示方法，我们鉴定出 G 蛋白 γ7 (Gγ7) 作为癌症相关基因，其表达在癌区域受到抑制 (BBRC.246, 1998)。 Gγ7 是一种三聚体 G 蛋白，参与细胞外信号向细胞内的传递。我们之前已经证实其表达在食管癌、胃癌和结直肠癌中减弱（Cancer Res. 59, 1999），但在本研究中，我们分析了原发性肝癌中的Gγ7表达并检验了其临床病理意义。使用转染的细胞进行分析。 [对象与方法] (1) 51例原发性肝癌切除病例的肝癌细胞系（HuH7、HepG2）及癌变（T）和非癌变（N）区域（肝细胞癌35例，胆管癌16例）分析Gγ7的表达。根据中位T/N比值将患者分为两组，比较检查其与临床病理因素（术前肝功能、肿瘤因素等背景因素）的相关性。 (2)将模拟基因和G蛋白γ7基因导入G蛋白γ7基因表达减弱的癌细胞系(KY150)中，并使用微阵列法比较基因表达。 [结果] (1) 1.Gγ7基因表达：在HuH7和HepG2中均观察到Gγ7的清晰表达。肝细胞癌中的T/N比值为1.1±1.2（中位数：0.81），与其他胃肠道癌症不同，在癌区没有观察到表达减弱。另一方面，胆管细胞癌中的T/N比为0.55±0.35（中位数：0.44），16例中只有1例的T/N比为1.0或更高，表明癌组织中的表达明显减弱。区域。 2.临床病理检查：在肝细胞癌中，Gγ7的表达与任何临床病理因素均无显着相关性。另一方面，在胆管细胞癌中，重度减毒组的ICGR15显着低于轻度减毒组（8.7±2.4 vs. 16.6±3.1%，P<0.01）。此外，重减毒组中全部8例均为中/低分化型或低分化型和低分化型，而轻减毒组中仅有3例为低分化型（8/8 vs. 0.3/8， P<0.01）。然而，其他病理因素如im、ly、v、pn因素或淋巴结转移等方面，两组之间没有观察到显着差异。 (2)DNA微阵列分析显示p27、TTK蛋白激酶和INK4c等细胞周期相关基因增加。 [总结] 1.在肝细胞癌中，癌区未观察到表达减弱，但在胆管癌中，与其他胃肠道癌症类似，在癌区观察到明显的表达减弱。对于已建立的细胞系，Gγ7在胰腺癌或胃肠道癌中几乎不表达，但在肝癌细胞系中观察到明确的表达。 2.胆管细胞癌中，癌部位高度弱表达的病例术前肝功能良好，不少病例属于低分化型。 (2)DNA微阵列分析显示Gγ7表达增强了p27、TTK蛋白激酶和INK4c等细胞周期相关基因。