ヒノキチオールによるメタロチオネインの合成誘導と制癌剤の副作用軽減

桧酚诱导金属硫蛋白合成并减少抗癌药物的副作用

基本信息

批准号：
09255207
负责人：
永沼章
金额：
$ 1.66万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

メタロチオネイン(MT)遺伝子のプロモーターに作用してMT合成を誘導する新しい物質を開発する目的で,MTプロモーターの支配下にβ-ガラクトシダーゼを恒常的に発現するL13-17細胞を用いて,約600種類の化合物についてMTプロモーター活性化作用を検討した。その結果,台湾ヒノキの抽出物であるヒノキチオールがL13-17細胞のβ-ガラクトシダーゼの活性を著しく上昇させることを見出した。ヒノキチオールのMTプロモーター活性化作用は,これまで知られている最も強力なMT合成誘導剤である塩化亜鉛とほぼ同程度であることから,塩化亜鉛に匹敵するMTプロモーター活性化能を有する薬物であると考えられる。ヒノキチオールをマウスL細胞の培養液に添加した後のMTmRNA量の経時変化をノーザンブロット法で解析したところ,ヒノキチオール添加4時間後からMTmRNA量の増加が観察され,その後12時間まで増加し続けた。同様の結果はヒト肝がん由来細胞であるHepG2細胞でも認められたことから,ヒノキチオールをリ-ド化合物として臨床応用可能なMT合成誘導剤の開発も期待できる。MTプロモーター上には様々な物質に応答する領域がそれぞれ存在するが,最も強力な応答を示すMREは亜鉛などの重金属により活性化される。そこで低濃度のヒノキチオールと亜鉛またはカドミウムを共存さたところ相乗的にMTプロモーターが活性化されることが判明した。このようにヒノキチオールは金属化合物と併用することによってMTプロモーターを相乗的に活性化することから,体内に比較的多量のカドミウムを含有する一般的な日本人の組織中MT濃度を上昇させる上で有用な可能性が考えられる。

为了开发作用于金属硫蛋白（MT）基因启动子诱导MT合成的新物质，我们利用在MT启动子控制下组成型表达β-半乳糖苷酶的L13-17细胞，开发了约600种物质研究了这些化合物的 MT 启动子激活作用。结果，我们发现扁柏提取物扁柏酚显着提高了 L13-17 细胞中 β-半乳糖苷酶的活性。扁柏酚的MT启动子激活效果与迄今为止已知的最强的MT合成诱导剂氯化锌几乎相同，因此被认为是具有与氯化锌相当的MT启动子激活能力的药物。当向小鼠L细胞的培养基中添加扁柏酚时，使用Northern blotting分析MT mRNA水平的时程变化，从添加扁柏酚后4小时开始观察到MT mRNA水平的增加，并持续增加。增加最多 12 小时。在源自人肝癌的细胞 HepG2 中也观察到了类似的结果，因此我们可以期待以扁柏酚为先导化合物开发临床适用的 MT 合成诱导剂。 MT启动子上有一些区域对各种物质有反应，但表现出最强反应的MRE是由锌等重金属激活的。因此，发现低浓度的扁柏酚与锌或镉共存可协同激活MT启动子。由于当与金属化合物组合使用时，扁柏酚可协同激活 MT 促进剂，因此对于增加体内镉含量相对较高的普通日本人组织中的 MT 浓度是有用的。