甲殻類のCHH族ペプチドをプローブとした昆虫前胸腺抑制ホルモンの検索

以甲壳动物CHH组肽为探针寻找昆虫前胸激素

基本信息

批准号：
08276204
负责人：
渡邉俊樹
金额：
$ 0.83万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08276204/
关键词：
昆虫甲殻類カイコ変態エクジソン前胸腺 CHH族ペプチド脱皮

项目摘要

甲殻類の眼柄中のX器官-サイナス腺系からは、血糖上昇、Y器官からのエクジソン放出の抑制、卵黄形成抑制等の活性を持つ構造的に類似した一群の神経ペプチド(CHH族ペプチド)が分泌される。CHH族ペプチドはクモ、バッタでも近年見つかっており、節足動物一般に広く存在すると予想されている。本研究は、完全変態を行う昆虫(ここではカイコ)においてCHH族ペプチドを分子生物学的手法を用いて検索し、その作用とりわけ前胸腺からのエクジソン放出の抑制活性の有無を調べることを目的としている。既知のCHH族ペプチドにおいて比較的良く保存された2つの領域のペプチド配列をもとに2つの縮重オリゴヌクレオチドプライマーを作成し、カイコのゲノムDNAをテンプレートとしたPCRを行い、CHH族ペプチドをコードする遺伝子配列の一部と思われる配列を得た。その配列の一部を用いて、5齢幼虫の中枢神経系およびそれに付随した内分泌器官より調製したcDNAをテンプレートとして5'RACE法を行い、5'側の配列を含むcDNA断片を得た。この断片(281ヌクレオチド)中には既知のCHH族ペプチドに類似した翻訳アミノ酸配列が含まれていることから、カイコのCHH族ペプチド前駆体をコードするmRNAの一部であると考えられた。今後はこのcDNAおよびそれがコードするペプチドの全構造の解析を行い、さらに産生細胞の同定およびペプチドの機能の解析を行う予定である。

甲壳类动物眼柄中的X器官-窦腺系统产生一组结构相似的神经肽（CHH家族肽），具有升高血糖、抑制Y器官释放蜕皮激素、抑制卵黄生成等活性。最近在蜘蛛和蚱蜢中发现了 CHH 家族肽，预计将广泛存在于节肢动物中。本研究的目的是利用分子生物学方法在经历完全变态的昆虫（此处为蚕）中寻找CHH组肽，并研究它们的作用，特别是它们是否有抑制前胸腺释放蜕皮激素的作用。根据已知CHH家族肽中两个相对保守区域的肽序列创建两个简并寡核苷酸引物，并使用家蚕基因组DNA作为模板进行PCR以编码CHH家族肽，我们获得了似乎是CHH家族肽的一部分的序列。基因序列。我们利用该序列的一部分，以5龄幼虫中枢神经系统和相关内分泌器官制备的cDNA为模板，进行5'RACE方法，以获得含有5'序列的cDNA片段。由于该片段(281个核苷酸)含有与已知的CHH组肽相似的翻译氨基酸序列，因此它被认为是编码家蚕CHH组肽前体的mRNA的一部分。未来，我们计划分析该cDNA的整体结构及其编码的肽，鉴定产生细胞，并分析肽的功能。