細胞骨格機能制御解析による神経可塑性の研究

通过分析细胞骨架功能调节研究神经可塑性

基本信息

批准号：
07278224
负责人：
乾誠
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07278224/
关键词：
シナプス後肥厚部テンシンリン酸化チロシン

项目摘要

シナプス後部にはシナプス後肥厚部(PSD)と呼ばれる特殊な構造が存在し、化学伝達物質物質受容体の集合、神経細胞間の接合、受容体感受性の制御などの機能に密接に関与していると考えられている。しかしながら、PSDの分子レベルでの構造、機能に関する解析は未だほとんど成されていない。本研究は、PSDの分子構築を明らかにし、機能蛋白質の同定及びPSD蛋白質間の相互作用の解析からシナプス機能を解明し、神経回路網形成における役割を明らかにすることを目的とする。ラット脳より調製したPSD分画には、約180kDaと110kDaの2つの主要なチロシンリン酸化蛋白質が存在する。これらのリン酸化を中心にいわゆる細胞接着部の細胞骨格系蛋白質がPSDの形成及び機能に重要な役割を果たしているのではないかという仮説のもとに、SH2ドメインを含む蛋白質、チロシンリン酸化蛋白質、アクチン関連細胞骨格蛋白質の検察を特異抗体を用いて行った。この際、PSD精製中に得られる各細胞下分画とPSD分画との比較からPSDへの局在を検討した。PSD分画には、カルスペクチンとCaMキナーゼIIの集積がみられ、、抗チロシンリン酸化抗体で染まる180kDaの蛋白質(NMDAレセプター2)も濃縮されている。このようなPSD分画を含めた各分画を用いてイムノブロットを行った結果、テンシン、α-アクチニンが著明にPSD分画に集積されていた。これに対し、src、パキシリン、ビンキュリン、FAKなどは、PSD分画に集積されていなかった。テンシンは、PSD分画を用いた金コロイド法による免疫電顕によってPSD構成員であることが示された。また、脳の発達に伴うテンシン発現量の変化を抗テンシン抗体を用いて調べた結果、ラット前脳の湿重量あたりのテンシン含量は、生後1週から2週にかけて著明に増加し、3週以降はほぼ一定であることが示された。すなわち、テンシンの発現は、シナプス形成時期に一致して著明に増加していた。以上の結果は、アクチン結合蛋白質であるテンシンが神経シナプスのPSDの構成蛋白質であることを示している。また、テンシンはアクチンフィラメントを同部位に固定する役割を担うと考えられる。しかしながら、パキシリン、ビンキュリン、FAKなどと局在を異にすることから、PSDにおけるテンシンは他の細胞接着部位でのテンシンの存在様式とは全く異なった形で存在すると考えられる。現在、PSDにおけるテンシンの結合蛋白質、存在様式の解析を精力的に進めている。

在突触的后部，有一个称为亚对照的特殊结构（PSD），该结构与一组化学变质物质受体（在神经细胞之间结合在一起）和控制受体敏感性密切相关。但是，对PSD分子水平的结构和功能的分析很少进行。这项研究的目的是阐明PSD分子的构建，从功能蛋白的鉴定中阐明突触函数，并分析PSD蛋白之间的相互作用，并阐明在神经回路网络形成中的作用。从大鼠大脑制备的PSD分裂具有两个主要的酪氨酸氧化物蛋白，约180 kDa和110 kDa。在以下假设的假设：So称呼的细胞胶上的So染色细胞骨骼蛋白可能在So染色的细胞胶的形成和功能中起重要作用使用特定的抗体进行氧化物蛋白质。目前，通过比较PSD纯化过程中获得的下部细胞分裂和PSD分裂，对公司进行了检查。 PSD部分是汽车光谱和CAM激酶II的积累，以及用抗-Chillosin -IN -IN -IN氧化抗体染色的180KDA蛋白（NMDA受体2）浓缩。由于使用这种零件分钟的图形，包括这样的PSD部分，TENSIN和α-肌动蛋白在PSD分裂中显着积累。另一方面，SRC，Paxilline，Binkulin，Fak等没有在PSD中积累。 Tensin使用PSD部分是通过金胶体方法通过免疫电子产品的PSD成分的成员。另外，由于使用抗固定蛋白抗体的张力变化与大脑发育有关，前脑中每只大鼠的张力蛋白量在出生后的1到2周都显着增加。这几乎是恒定的。换句话说，与突触形成期一致的Tencin的表达显着增加。以上结果表明，肌动蛋白结合蛋白Tensin是神经突触PSD的PSD构型蛋白。人们认为Tensin将在将肌动蛋白细丝固定到同一站点中发挥作用。但是，由于定位与paxilline，binkurin，fak等不同，因此人们认为PSD中的tensin与其他细胞粘合剂位点的Tensin完全不同。当前，正在积极促进对PSD中Tencin结合蛋白和样式样式的分析。