多剤耐性遺伝子の関与しない抗癌剤の感受性を左右する因子の解明に関する研究

阐明不涉及多药耐药基因的抗癌药物敏感性影响因素的研究

• 批准号: 06282268
• 负责人: 西條 長宏
• 金额: $ 2.69万
• 依托单位: National Cancer Center Research Institute and Research Center for Innovative Oncology, National Cancer Center Hospital East
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 1995
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06282268/
• 关键词: 抗がん剤; 多剤耐性

P糖蛋白の関与しない多剤耐性機構を分子レベルで明らかにする事を究極の目的とした。細胞のリン酸化の状態が薬剤感受性に関わりもつ事実は従来から散発的にはあるものの直接的な証明は乏しい。本研究ではPKCのactivatorであるTPAと、phosphataseのinhibitorのokadaic acid(OA)に対する耐性株を樹立しその特性を分析するとともに克服法の開発を試みた。1.TPA耐性K562細胞(K562/TPA)はP糖蛋白の関与しない多剤耐性細胞であり、細胞内薬剤蓄積の低下はみられない。K562/TPAではアドリアマイシン(ADM)は主に細胞質へ分布し核にはわずかに認められたにすぎなかった。チロシンキナーゼ阻害剤genisteinにより抗癌剤のK562/TPAに対する細胞傷害能は上昇するとともに細胞内へのADMの蓄積も増加した。又ADMなどによるDNAの単鎖切断も増加し、genisteinにより薬剤耐性を克服しうると示唆された。シグナル伝達機構に作用する物質が薬剤耐性を修飾しうる事実は、耐性克服に重要な示唆をもたらした。2.抗癌剤耐性細胞はprotein phoshatase(PP)阻害剤であるokadaic acid(OA)に対しても耐性化した。OAに対する耐性機構を解明するため、肺小細胞癌株H69よりOA耐性株(H69/OA)を樹立した。H69/OAにおけるPP活性は有意に低く、PP(PP1,PP2Aとも)はOAによる抑制に対し抵抗性を示した。OAによるH69/OA100のp34^<cdc2>kinaseの脱リン酸化は、抑制されていた。OAによるG2/M blockはPP阻害を介したp34^<cdc2>kinaseのtyrosine residueへの作用によって誘導されると示唆された。H69/OA100ではOAによるp34^<cdc2>kinaseのtyrosine residueの脱リン酸化が阻害されるためG2/M blockがおこらないと示唆された。PPは細胞周期の調節に重要な役割を果していると示された。

最终目标是阐明在分子水平上与P-糖蛋白不涉及的多药电阻的机制。尽管传统上有零星的事实，即细胞磷酸化状态与药物敏感性有关，但几乎没有直接的证据。在这项研究中，我们在磷酸酶抑制剂中建立了对TPA，PKC激活剂和冈田酸（OA）的抗性，分析了其特性，并试图开发一种克服它的方法。 1。耐TPA的K562细胞（K562/TPA）是不涉及P-糖蛋白的多药耐药细胞，并且细胞内药物积累没有降低。 Adrimycin（ADM）主要分布在细胞质中，仅在K562/TPA的细胞核中略微发现。酪氨酸激酶抑制剂染料蛋白酶增加了抗癌剂K562/TPA的细胞毒性潜力，并且ADM在细胞中的积累增加。还提出，ADM或类似的单链DNA断裂也可能会增加，而染料木黄酮可以克服耐药性。作用在信号机械上的物质可以改变耐药性，这为克服抗药性提供了重要建议。 2。抗癌药物也对蛋白质磷酸酶（PP）抑制剂的冈田酸（OA）具有抗性。为了阐明对OA耐药性的机制，从小细胞肺癌菌株H69建立了OA抗性菌株（H69/OA）。 H69/OA中的PP活性显着降低，PP（也是PP1和PP2A）对OA的抑制作用。 OA被抑制了H69/OA100的p34^<cdc2>激酶的去磷酸化。有人提出，OA通过PP抑制介导的p34^<cdc2>激酶对酪氨酸保留的作用诱导的G2/M块。有人提出，由于抑制了OA的p34^<cdc2>激酶酪氨酸保留p34^<cdc2>的去磷酸化，因此没有发生G2/M阻塞。 PP已显示在细胞周期调节中起重要作用。