mdrl遺伝子の関与しない薬剤に対する感受性の向上に関する基礎的研究

提高不涉及mdrl基因的药物敏感性的基础研究

基本信息

批准号：
05152152
负责人：
西條長宏
金额：
$ 2.56万
依托单位：
National Cancer Center Research Institute and Research Center for Innovative Oncology, National Cancer Center Hospital East
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至 1994
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05152152/
关键词：
Non-mdr多剤耐性 Na^+K^+ATPase シスプラチン p34^<alpha±2>キナーゼ

项目摘要

mdrl遺伝子の関与しない薬剤に対する感受性の向上に関する基礎的研究大多数を占める固形癌に対し有効な抗癌剤であるシスプラチンを含むアルキル化剤、トポイソメラーゼ1阻害剤などに対する薬剤耐性にはmdrlは関与していない。固形癌に対する化学療法の治療成績向上のためにはこれらの薬剤に対する耐性機構を解明しその克服法を開発する事が必須といえる。シスプラチンが細胞膜を通過する機構及び耐性株で蓄積が低下する機構は完全には解明されていない。Na^<+,>K^<+->ATPaseの発現と細胞内シスプラチン蓄積の関係を明らかにするためウアバイン耐性株を樹立しその特性を検討した。ウアバイン耐性株は母細胞と比べウアバインに対し2倍の耐性度を示すとともにシスプラチンに対し4倍感受性亢進した。細胞内へのシスプラチンの蓄積は母細胞と比べ2.7倍に増加した。ウアバイン耐性株では^<86>RB^+流入率よりみたNa^+,K^<+->ATPase活性は1.6倍に増加していた。又Na^+,K^<+->ATPase mRNAの発現も著明に増加していた。アンホテリシンB(AmB)、は細胞膜に作用する事によってシスプラチン耐性を克服すると考えられている。AmB処理によりシスプラチン耐性株では細胞内への抗癌剤蓄積が増加するとともに、DNA鎖間架橋が有意に増加した。DNA鎖間架橋の量とIC50は逆相関した。これらの事実からシスプラチンの細胞内への蓄積が肺癌細胞株のシスプラチン感受性を規定する重要な因子と考えられる。DNA障害能を有する抗癌剤は細胞をG2期に集積される事が知られている。G2M期での細胞回転のregulatorとして作用するp34^<alpha±2>protein kinAseのリン酸化、脱リン酸化に及ぼすシスプラチンの作用を検討した。シスプラチンによりG2期に停止した細胞ではp34^<alpha±2>kinaseの脱リン酸化は認められなかった。すなわちシスプラチンはp34^<alpha±2>kinaseの脱リン酸化を阻害する事によりこのkinase活性を阻害し細胞周期の停止を引きおこすと示唆された。

关于提高不涉及MDRL基因MDRL药物易感性的基础研究不参与耐药性对包括顺铂，抗固体癌症和拓扑异构酶1抑制剂的抗癌剂，有效的抗癌剂。为了改善固体癌症化疗的结果，必须阐明对这些药物的抗性机制，并开发克服它们的方法。顺铂通过细胞膜的机制以及积累降低抗性菌株的机制尚未完全了解。为了阐明Na^<+，> k^<+ - > ATPase表达与细胞内顺铂积累之间的关系，建立了ouaabain抗性菌株并检查了其特性。与母细胞相比，乌巴因抗性菌株对瓦巴因的抗性是两倍，而对顺铂敏感的四倍。与母细胞相比，顺铂在细胞中的积累增加了2.7倍。在ouaabain抗性菌株中，Na^+，k^<+ - > ATPase活性，从^<86> rb^+涌入率中看到，增加了1.6倍。此外，Na^+，K^<+ - > ATPase mRNA的表达也显着增加。人们认为两性霉素B（AMB）通过作用在细胞膜上克服顺铂的抗性。 AMB处理增加了抗铂抗菌菌株中细胞中抗癌剂的积累，并显着增加了DNA链间交联。 DNA间交联和IC50的量成反比。这些事实表明，顺铂的细胞内积累是定义肺癌细胞系的易感性的重要因素。已知具有DNA抑制能力的抗癌剂在G2期积累细胞。顺铂研究对p34^<alpha±2>蛋白激酶的磷酸化和去磷酸化的影响，该蛋白激酶在G2M期充当细胞旋转的调节剂。未观察到p34^<alpha±2>激酶的去磷酸化在顺铂在G2阶段停滞的细胞中观察到。换句话说，建议顺铂通过抑制p34^<alpha±2>激酶的去磷酸化来抑制激酶活性，从而导致细胞周期停滞。