生体・人工レセブタ-のシグナル増幅機能に基づく高感度センシング膜の基本設計

基于生物/人工受体信号放大功能的高灵敏传感膜的基本设计

基本信息

批准号：
03205001
负责人：
梅澤喜夫
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

イオンチャンネル及び能動輸送機能を有するセンシング膜の開発を人工及びバイオ両面からのアプロ-チにより行った。得られた研究成果の概要は以下の様である。1. ポリイミド製支持薄膜を用い単分子膜貼り合わせ法により単一のグルタミ酸レセプタ- (GluR) イオンチャンネル及び10分子以上のGLuRを含むシングル及びマルチチャンネルセンサ-を作製した。両センサ-について,検出下限がそれぞれ〈10^<-8> Mおよび〈10^<-7> Mという高い感度が得られた。さらに,シグナル増幅能として1.9×10^7(per second)という極めて大きな値が得られた。2. モルモット小腸刷子縁膜から単離,精製したNa^+/〓ーグルコ-ス共輸送体を用いて,〓ーグルコ-ス能動輸送脂質二分子膜センサ-を作製し,10^<-9> Mの検出感度を得た。また,Na^+,K^+ーATPase 包埋脂質二分子膜の膜電位について検討し,この膜はATP 濃度に依存した膜電位を生起することを見出した。3. 長鎖アルキル型βーシクロデキストリンの圧縮単分子膜を用いて,βーシクロデキストリンの内孔(チャンネルの入口)を通過できる大きさのρーキノンと,通過できない大きさの〔Mo(CN)_8〕^<4->及び〔Co(phen)_3〕^<2+>について,ゲスト(シクロヘキサノ-ル等)の添加によるマ-カ-透過性の変化を,inーtrough cyclic voltammetryにより測定した。その結果,ゲスト分子によるチャンネル入口の直接的ブロックに基づく分子内チャンネルの透過性制御が可能であることが明らかとなった。4. バリノマイシン包埋単分子膜において,表面圧ー面積(πーA)曲線を測定することにより,ゲストにより誘起されるマ-カ-イオン透過性の変化の機構を明らかにした。

具有离子通道和主动运输函数的传感膜的发展是由人工和生物基的侧面进行的。获得的研究结果的轮廓如下。 1。聚酰亚胺支持的薄膜使用单个膜糊创建单个谷氨酸接收器 - （GL）离子通道以及一个包含10或更多Glur的单个和多通道传感器。对于这两个传感器，都获得了<10^<-8> m和<10^<-7> m的高灵敏度，每个检测到了下限。此外，以信号放大能力获得了非常大的1.9×10^7（每秒）。 2。使用小肠支气管膜膜的摩尔莫尔二河河流胶片，一种使用共传递的转移器，10^<-9>我获得了M的检测灵敏度。此外，还检查了Na^+，K^+ -ATPase包裹的脂质大膜的膜电位，并且该膜引起依赖于ATP浓度的膜电位。 3。长链烷基β -sichrodextrin压缩的矿山，以及可以穿过β-二雪糊精的内部孔（通道的入口）的大小，而无法通过的大小[mo（cn） <4->和[co（phen）_3]^<2+>测量。结果，可以揭示出来宾分子在通道入口的直接块下方对内通道的透明控制。 4。在Balino Maocin包裹的单一膜膜中，通过测量表面压力-A曲线（π-A）来揭示Ma-ion渗透性透明度变化的机理。