Fundamental researches for antibody medicine development by the virus vector aiming at control of the immune response

以控制免疫反应为目标的病毒载体抗体药物开发基础研究

• 批准号: 16590086
• 负责人: ITO Yuji
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16590086/
• 关键词: Antibody phage library; immune response control; Sendai virus vector; costimulatory molecule; gene expression; antibody medicine; gene therapy; 抗体医薬; 遺伝子治療; 免疫抑制

本研究では、自己免疫疾患治療、ガンなどの治療に重点をおいた抗体医薬の開発とその遺伝子治療への応用を目的に、補助刺激分子に特異的なヒト抗体(阻害抗体)遺伝子を発現するウイルスベクターによるT細胞応答の制御効果を評価することを試みた。本研究で、すでに、抗CD86抗体、抗B7RP-1抗体、抗HMGB-1抗体などをヒト抗体ファージディスプレイライブラリから単離し、その抗原との結合活性を詳細に検討した。抗CD86抗体、抗B7RP-1抗体は、その抗原である抗原提示細胞に存在するCD86、B7RP-1に結合し、カウンターレセプターとの相互作用をブロックすることで、免疫抑制効果をもつことを明らかにした。一方で、抗HMGB-1抗体については、ガンや敗血症において、致死的因子として近年注目されているHMGB-1の炎症性機能をブロックする目的でいくつかの特異的な抗体を単離したが、未だ、HMGB-1の炎症性サイトカインの機能を阻害するところまでには至っていない。これらの抗体遺伝子を免疫系のあるいは血管内内皮系の細胞にウイルスベクターにより導入発現させ、免疫制御や炎症の制御を行う実験を試みた。実際にセンダイウイルスベクターにGFP遺伝子を搭載して、細胞に感染後その細胞内での発現がおこることは確認した。しかしながら、抗体遺伝子(単鎖Fv抗体)をセンダイウイルスベクターに搭載し、細胞外への分泌発現並びに発現された抗体による免疫制御活性の測定を試みたが、満足の行く結果は得られなかった。以上の結果から、発現される単鎖Fv抗体の発現量と安定性に問題があると考えられ、ウイルスベクターで動物細胞に発現させた場合、発現量が高く安定で力価の高い単鎖Fv抗体への変換が必要であり、現在引き続き、研究を行っている。

在本研究中，我们将表达共刺激分子特异的人类抗体（抑制性抗体）基因，旨在开发专注于自身免疫性疾病治疗和癌症治疗的抗体药物，并尝试将其应用于基因治疗。病毒载体控制 T 细胞反应的研究。在本研究中，我们已经从人抗体噬菌体展示库中分离出抗CD86抗体、抗B7RP-1抗体、抗HMGB-1抗体等，并详细检查了它们的抗原结合活性。抗 CD86 抗体和抗 B7RP-1 抗体已被证明通过与其抗原呈递细胞中的抗原 CD86 和 B7RP-1 结合并阻断与反受体的相互作用而具有免疫抑制作用。另一方面，关于抗HMGB-1抗体，我们分离出几种特异性抗体，用于阻断HMGB-1的炎症功能，HMGB-1最近作为癌症和败血症的致死因素而受到关注。达到抑制 HMGB-1 炎症细胞因子功能的程度。我们尝试通过使用病毒载体将这些抗体基因引入并表达到免疫系统或血管内皮系统的细胞中来控制免疫和炎症。经证实，GFP基因确实被装载到仙台病毒载体中，并在感染后在细胞内表达。然而，尽管我们将抗体基因（单链Fv抗体）携带到仙台病毒载体中，并尝试将其分泌到细胞外空间并测量表达的抗体的免疫调节活性，但没有获得令人满意的结果。从以上结果可以认为，单链Fv抗体的表达水平和稳定性存在问题，并且当使用病毒载体在动物细胞中表达时，具有高表达水平、稳定性和稳定性的单链Fv抗体。高滴度的抗体的转换是必要的，目前正在进行研究。

项目成果

Binding Epitope of Human Anti-FcεRI α-chain Receptor Antibody, RE51, with the Blocking Activity on IgE-mediated Histamine Release

人抗 FcεRI α 链受体抗体 RE51 的结合表位，对 IgE 介导的组胺释放具有阻断活性

• 发表时间: 2004
• 期刊: Immunology2004(Ed : Medimond S.r.l.)
• 作者: 橋口周平(他;3名)
• 通讯作者: 3名)

タンパク質研究のための抗体実験マニュアルるバクテリオファージ

蛋白质研究噬菌体抗体实验室手册

• 发表时间: 2004
• 作者: 伊東 祐二;橋口 周平;et. al.
• 通讯作者: et. al.

ヒト抗ヒトB7RP-1抗体、該抗体フラグメント、及びその利用方法

人抗人B7RP-1抗体、抗体片段及其使用方法

• 发表时间: 2004

Molecular characterization of a 10-kDa buckwheat molecule reactive to allergic patients' IgE

• DOI: 10.1046/j.1398-9995.2003.00412.x
• 发表时间: 2004-05-01
• 期刊: ALLERGY
• 影响因子: 12.4
• 作者: Matsumoto, R;Fujino, K;Sugimura, K
• 通讯作者: Sugimura, K

Three dimensional molecular design using monoclonal antibody

使用单克隆抗体进行三维分子设计

• 发表时间: 2004
• 期刊: Molecular and Cellular Therapies 3
• 作者: Ito;Y.;Tanaka;K.;et. al.
• 通讯作者: et. al.