Construction of human antibody library and establishment of selection method to develop fragment antibody therapeutics

人抗体库的构建和片段抗体疗法开发选择方法的建立

• 批准号: 21390032
• 负责人: ITO Yuji
• 金额: $ 9.48万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21390032/
• 关键词: 医薬分子機能学; 抗体; 低分子化抗体; T7ファージ; ファージ提示法; 安定性

In this study, we constructed the libraries of human single-chain Fv antibody and llama VHH antibody using T7 phage display system and established the selection method to isolate the specific phages. Especially, we succeeded in the isolation of the T7 phage clones binding to the antigens from the library, which indicates our library system is useful for a rapid generation of specific antibodies. On the other hand, we found the problematic issues that the non-specific binding phages were enriched by selection process because of folding problems and instability of antibody, which should be solved in the further investigations.

在本研究中，我们利用T7噬菌体展示系统构建了人单链Fv抗体和美洲驼VHH抗体文库，并建立了分离特定噬菌体的选择方法。特别是，我们成功地从文库中分离出了与抗原结合的T7噬菌体克隆，这表明我们的文库系统对于快速生成特异性抗体是有用的。另一方面，我们发现由于抗体的折叠问题和不稳定性，非特异性结合噬菌体通过选择过程被富集的问题，应该在进一步的研究中解决。

项目成果

T7ファージライブラリを用いたヒト抗体結合ペプチドのデザインと評価,第4回生体分子科学シンポジウム

使用T7噬菌体库设计和评估人类抗体结合肽，第四届生物分子科学研讨会

• 发表时间: 2011
• 作者: 入村達郎;岡山博人;清水孝雄監訳;阿部紘平;伊東祐二
• 通讯作者: 伊東祐二

特許出願

专利申请

• 发表时间: 2011

Discovery and Characterization of a Peptide Motif That Specifically Recognizes a Non-native Conformation of Human IgG Induced by Acidic pH Conditions

• DOI: 10.1074/jbc.m807618200
• 发表时间: 2009-04-10
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Sakamoto, Kotaro;Ito, Yuji;Sugimura, Kazuhisa
• 通讯作者: Sugimura, Kazuhisa

ファージライブラリによるヒト抗体結合性ペプチドリガンドの探索と応用

利用噬菌体文库寻找人抗体结合肽配体并应用

• 发表时间: 2011
• 作者: 武内恒成;他;伊東祐二
• 通讯作者: 伊東祐二

Isolation and Affinity Maturation of Human IgA-Specific Peptide from Random Peptide T7 Phage Library for Designing a New IgA Affinity Ligand

从随机肽 T7 噬菌体库中分离人类 IgA 特异性肽并进行亲和力成熟，用于设计新的 IgA 亲和配体

• 发表时间: 2012
• 期刊: Peptide Science 2011
• 作者: Hatanaka T.;Tsukamoto S.;Sakamoto K.;Arima K.;Ito Y.
• 通讯作者: Ito Y.