水晶体分化とクリスタリン発現の転写因子群の研究

晶状体分化和晶状体蛋白表达转录因子的研究

基本信息

批准号：
05273207
负责人：
近藤寿人
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

δ-クリスタリン発現は遺伝子第3イントロンのなかにあるエンハンサーによって大きく支配され、その水晶体特異性は、エンハンサーの中のDC5領域によって規定されている。DC5領域に体する抑制因子δEF1はCACCTをコンセンサスとする配列に特異的に結合することが明らかにされた。CACCTはEbox配列のサブグループ(E2-box)に含まれ、従って、bHLHタイプの転写活性化因子の一部に対する拮抗的抑制因子として作用するのではないかと予想され、またそれを裏付ける実験結果を得た。胚においては、脊索、筋節などの中胚葉組織においてδEFIの発現が際だっていた。筋節におけるδEF1の発現はMyoDファミリーの発現と同時期であり、Eboxを介したMyoDファミリーによる転写制御に対して積極的に干渉していると考えられる。脊索の形成と機能発現に必須なBrachyury(T)蛋白質の結合配列がCACCTを含むことから脊索においてδEF1は、Brachyuryによる転写制御に対しても抑制的に作用している可能性がある。従って、δEF1は、δクリスタリンの水晶体特異的な発現に関与するだけでなく、bHLH蛋白質などに対する抑制因子として、胚発生のさまざまな舞台で重要な働きをしていると考えられる。その作用の全体像をつかむために、δEF1欠損マウスを作製し、表現型を解析している。DC5領域の2つの活性化領域のうちの1つに結合するδEF2のcDNAをクローニングしたところ、Soxファミリーに属することが明らかになった。クローン化されたδEF2を強制発現することによって、δEF2のエンハンサー活性化能が確認された。

δ-晶状体表达在基因的第三个内含子内的增强子严格控制，其透镜特异性由增强子内的DC5区域定义。据表明，形成DC5区域的抑制剂ΔEF1专门与与CACCT的序列共识结合。 CACCT包括在E框序列（E2-Box）的亚组中，因此有望充当某些BHLH型转录激活剂的拮抗抑制剂，并获得了实验结果以支持这一点。在胚胎中，ΔEFI表达在中胚层组织（如诺牙和讽刺）中尤为突出。在肉瘤中ΔEF1的表达与Myod家族的表达相吻合，并且被认为在干扰Myod家族的Ebox介导的转录调控方面是积极的。由于对于脊索形成和功能表达是必不可少的，在脊索中包含CACCT，因此在脊索中包含CACCT，因此在脊索中也可能对Brachyury的转录调节作用，因此脑乳元（T）蛋白的结合序列是必不可少的。因此，ΔEF1不仅参与δ晶体蛋白的透镜特异性表达，而且在胚胎发育的各个阶段都起着重要作用，作为BHLH蛋白等的抑制。为了完整地了解其效果，产生ΔEF1缺陷型小鼠并分析表型。克隆与DC5区域的两个激活区域之一结合的ΔEF2的cDNA，发现它属于Sox家族。克隆的ΔEF2的增强表达证实了ΔEF2的增强子活化能力。