肝細胞のがん化における細胞間相互作用を介した星細胞の役割

星状细胞通过细胞间相互作用在肝细胞癌变中的作用

• 批准号: 22H03061
• 负责人: 河田 則文
• 金额: $ 10.98万
• 依托单位: Osaka Metropolitan University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H03061/
• 关键词: 星細胞; 肝線維化; Cytoglobin; コラーゲン; TGFβ; TGF-β; ROS

肝癌発生に関してin vivo発がんモデルで検討した。野生型とサイトグロビン（Cytoglobin）ノックアウトマウスのそれぞれに、15日齢時に体重1 kgあたり6 mgのDiethylnitrosamine（DEN）を腹腔内投与し、12ヶ月間に亘って腫瘍形成を観察した。最終時点で肝臓と血清を採取し、一部のグループ（n = 3匹/グループ）は、単一細胞解析に使用した。門脈灌流により肝臓から非実質細胞を分離し、プロナーゼ・コラーゲナーゼ酵素的灌流法により単一細胞を採取し、洗浄、赤血球と死細胞を除去し、100万細胞/mlに調整し、細胞生存率はTrypan blue法で評価した。サンプルは、Chromium single cell 3' reagent kits version 2、chip and controller（10 X Genomics）を使用してドロップレットベースのRNA-seqで処理され、メーカーの推薦する条件に指示に従って解析した。3つの非実質細胞タイプ、肝星細胞（HSC）、クッパー細胞（KC）、肝類洞内皮細胞（LSEC）の特定マーカーを使用し、アノテーションステップでの初期データ解析を行ったところ、DEN処理された肝臓ではKCに2つのサブクラスター、LSECに4つのサブクラスター、およびHSCに4つのサブクラスターがあることが判明した。 CytoglobinノックアウトマウスのLSECとWTマウスのLSECを比較したところ、異なる遺伝子発現があることが判明し、log2が1以上とした場合150の遺伝子が変化した。変化したトップ10遺伝子には、Rgs5、Apoa2、Serping1、Gm8797、Fgb、Mup10、Sod3、Chchd2、Cxcl12、Ifitm1が含まれていた。

使用体内致癌模型研究肝癌的发展。 15日龄时，野生型和细胞珠蛋白敲除小鼠腹腔注射每公斤体重6毫克二乙基亚硝胺（DEN），并在12个月的时间内观察肿瘤形成。在最终时间点收集肝脏和血清，一些组（n = 3只动物/组）用于单细胞分析。通过门静脉灌注从肝脏中分离出非实质细胞，通过链霉蛋白酶-胶原酶酶灌注收集单细胞，洗涤，除去红细胞和死细胞，调整至100万个细胞/ml，并用测定细胞存活率来评价。台盼蓝法。使用 Chromium 单细胞 3' 试剂盒版本 2、芯片和控制器 (10X Genomics) 对样品进行基于液滴的 RNA 测序处理，并根据制造商推荐的条件和说明进行分析。在注释步骤中，使用三种非实质细胞类型（肝星状细胞（HSC）、库普弗细胞（KC）和肝窦内皮细胞（LSEC）的特定标记）进行的初始数据分析表明，经过 DEN 处理的肝脏中，我们发现KC 有两个子簇，LSEC 有四个子簇，HSC 有四个子簇。当将细胞珠蛋白敲除小鼠的LSEC与WT小鼠的LSEC进行比较时，发现存在不同的基因表达，当log2设置为1或更大时，有150个基因发生改变。改变最多的 10 个基因包括 Rgs5、Apoa2、Serping1、Gm8797、Fgb、Mup10、Sod3、Chchd2、Cxcl12 和 Ifitm1。

项目成果

Cancer cells produce liver metastasis via gap formation in sinusoidal endothelial cells through proinflammatory paracrine mechanisms.

• DOI: 10.1126/sciadv.abo5525
• 发表时间: 2022-09-30
• 期刊: Science advances
• 影响因子: 13.6

Cytoglobin, Neuroglobin, Myoglobin, but not Hemoglobin Exhibited Anti-Fibrotic Properties In Vitro and In Vivo

细胞红蛋白、神经球蛋白、肌红蛋白（但血红蛋白除外）在体外和体内表现出抗纤维化特性

• 发表时间: 2022
• 作者: Le Thi Thanh Thuy;Vu Ngoc Hieu;Hoang Hai;Dinh Viet Hoang;and Norifumi Kawada
• 通讯作者: and Norifumi Kawada

Anti-fibrotic Capacity of Extracellular Globins via Scavenging Reactive Oxygen Species

细胞外球蛋白通过清除活性氧的抗纤维化能力

• 发表时间: 2022
• 作者: Le Thi Thanh Thuy;Vu Ngoc Hieu;Hoang Hai;and Norifumi Kawada
• 通讯作者: and Norifumi Kawada

Baseline sCD27, sCD28, and sCD40 levels - novel predictors of HCC development in HCV-SVR patients

基线 sCD27、sCD28 和 sCD40 水平 - HCV-SVR 患者 HCC 发展的新预测因子

• 发表时间: 2023
• 作者: Le Thi Thanh Thuy;Minh Phuong Dong;Hoang Hai;Sawako Uchida-Kobayashi;Masaru Enomoto;Akihiro Tamori and Norifumi Kawada
• 通讯作者: Akihiro Tamori and Norifumi Kawada

Capacity of extracellular globins to reduce liver fibrosis via scavenging reactive oxygen species and promoting MMP-1 secretion.

• DOI: 10.1016/j.redox.2022.102286
• 发表时间: 2022-06
• 期刊: Redox biology
• 影响因子: 11.4
• 作者: Hieu VN;Thuy LTT;Hai H;Dat NQ;Hoang DV;Hanh NV;Phuong DM;Hoang TH;Sawai H;Shiro Y;Sato-Matsubara M;Oikawa D;Tokunaga F;Yoshizato K;Kawada N
• 通讯作者: Kawada N