肝細胞のがん化における細胞間相互作用を介した星細胞の役割

星状细胞通过细胞间相互作用在肝细胞癌变中的作用

基本信息

批准号：
22H03061
负责人：
河田則文
金额：
$ 10.98万
依托单位：
Osaka Metropolitan University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H03061/
关键词：
星細胞肝線維化 Cytoglobin コラーゲン TGFβ TGF-β ROS

项目摘要

肝癌発生に関してin vivo発がんモデルで検討した。野生型とサイトグロビン（Cytoglobin）ノックアウトマウスのそれぞれに、15日齢時に体重1 kgあたり6 mgのDiethylnitrosamine（DEN）を腹腔内投与し、12ヶ月間に亘って腫瘍形成を観察した。最終時点で肝臓と血清を採取し、一部のグループ（n = 3匹/グループ）は、単一細胞解析に使用した。門脈灌流により肝臓から非実質細胞を分離し、プロナーゼ・コラーゲナーゼ酵素的灌流法により単一細胞を採取し、洗浄、赤血球と死細胞を除去し、100万細胞/mlに調整し、細胞生存率はTrypan blue法で評価した。サンプルは、Chromium single cell 3' reagent kits version 2、chip and controller（10 X Genomics）を使用してドロップレットベースのRNA-seqで処理され、メーカーの推薦する条件に指示に従って解析した。3つの非実質細胞タイプ、肝星細胞（HSC）、クッパー細胞（KC）、肝類洞内皮細胞（LSEC）の特定マーカーを使用し、アノテーションステップでの初期データ解析を行ったところ、DEN処理された肝臓ではKCに2つのサブクラスター、LSECに4つのサブクラスター、およびHSCに4つのサブクラスターがあることが判明した。 CytoglobinノックアウトマウスのLSECとWTマウスのLSECを比較したところ、異なる遺伝子発現があることが判明し、log2が1以上とした場合150の遺伝子が変化した。変化したトップ10遺伝子には、Rgs5、Apoa2、Serping1、Gm8797、Fgb、Mup10、Sod3、Chchd2、Cxcl12、Ifitm1が含まれていた。

在体内癌变模型中检查了肝癌发育。每公斤体重在15天大时，每公斤体重腹膜内用野生型和细胞蛋白基因敲除小鼠用6毫克的二乙基硝基胺（DEN）进行腹膜内，观察到肿瘤发生12个月。在最后一个时间点收集肝脏和血清，并使用一些组（n = 3只动物/组）进行单细胞分析。通过门户灌注从肝脏中分离出非辅助细胞，通过pronase-collainase酶灌注方法收集单细胞，洗涤，红细胞和死细胞，调整为100万细胞/mL，并使用锥虫蓝色方法评估细胞活力。使用基于液滴的RNA-SEQ处理样品，使用Chromium Single 3'试剂盒版本2，芯片和控制器（10 X基因组），并根据制造商的建议条件进行分析。 Initial data analysis was performed using specific markers of three non-parenchymal cell types, liver stellate cells (HSC), Kupffer cells (KC), and hepatic sinusoidal endothelial cells (LSEC), and initial data analysis at annotation steps revealed that in DEN-treated livers there were two subclusters in KC, four subclusters in LSEC, and four subclusters in HSC.将细胞蛋白基因敲除小鼠的LSEC与WT小鼠的LSEC进行比较，发现当Log2为1或更高时，有不同的基因表达和150个基因。前10个改变的基因包括RGS5，APOA2，SERPIT1，GM8797，FGB，MUP10，SOD3，CHCHD2，CXCL12和IFITM1。

项目成果

期刊论文数量（10）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Cancer cells produce liver metastasis via gap formation in sinusoidal endothelial cells through proinflammatory paracrine mechanisms.

DOI：
10.1126/sciadv.abo5525
发表时间：
2022-09-30
期刊：
Science advances
影响因子：
13.6
作者：
通讯作者：

Cytoglobin, Neuroglobin, Myoglobin, but not Hemoglobin Exhibited Anti-Fibrotic Properties In Vitro and In Vivo

细胞红蛋白、神经球蛋白、肌红蛋白（但血红蛋白除外）在体外和体内表现出抗纤维化特性

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Le Thi Thanh Thuy;Vu Ngoc Hieu;Hoang Hai;Dinh Viet Hoang;and Norifumi Kawada
通讯作者：
and Norifumi Kawada

Anti-fibrotic Capacity of Extracellular Globins via Scavenging Reactive Oxygen Species

细胞外球蛋白通过清除活性氧的抗纤维化能力

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Le Thi Thanh Thuy;Vu Ngoc Hieu;Hoang Hai;and Norifumi Kawada
通讯作者：
and Norifumi Kawada

Baseline sCD27, sCD28, and sCD40 levels - novel predictors of HCC development in HCV-SVR patients

基线 sCD27、sCD28 和 sCD40 水平 - HCV-SVR 患者 HCC 发展的新预测因子

DOI：
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
Le Thi Thanh Thuy;Minh Phuong Dong;Hoang Hai;Sawako Uchida-Kobayashi;Masaru Enomoto;Akihiro Tamori and Norifumi Kawada
通讯作者：
Akihiro Tamori and Norifumi Kawada

Capacity of extracellular globins to reduce liver fibrosis via scavenging reactive oxygen species and promoting MMP-1 secretion.

DOI：
10.1016/j.redox.2022.102286
发表时间：
2022-06
期刊：
Redox biology
影响因子：
11.4
作者：
Hieu VN;Thuy LTT;Hai H;Dat NQ;Hoang DV;Hanh NV;Phuong DM;Hoang TH;Sawai H;Shiro Y;Sato-Matsubara M;Oikawa D;Tokunaga F;Yoshizato K;Kawada N
通讯作者：
Kawada N