肝星細胞活性化の分子解析とそれを利用した肝線維化抑制法の開発

肝星状细胞活化的分子分析及利用其抑制肝纤维化方法的开发

• 批准号: 09770372
• 负责人: 河田 則文
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Osaka City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770372/
• 关键词: 肝線維化; 星細胞; サイトカイン; 増殖因子; 細胞外マトリックス; 肝障害; 線維化; ユラ-ゲン; 転写因子

肝特異的pericyteとしての星細胞がいわゆる活性化を受け筋線維芽様細胞へと形質転換することが本細胞の代謝動態を劇的に変動させるのでそれに伴い発現する遺伝子や蛋白の解析をおこなった。まず増殖関連遺伝子としてcyclin,cyclin-dependent kinase(CDK)とcyclin-dependent kinase inhibitor(CKl)の発現を検討した。その結果、CDKやCKlの発現はほとんど変動しなかったが、cyclin Dとcyclin EなどのG1 cyclinが星細胞の増殖に先立って発現した。増殖因子しては血小板由来成長因子(PDGF)が極めて重要であり、PDGF受容体の発現とそれ自信のチロシンリン酸化も星細胞の増殖を制御した。さらに新しいシグナルとしてAkt/PKBが星細胞のcyclin発現に関与することを見い出した。また、2次元電気泳動を用いた解析から、活性化星細胞ではcofilin,calgizarrin,calcyclinなどのアクチン結合蛋白が高発現することを見い出した。星細胞を認識するモノクローン抗体を作成して、その抗原を解析するアプローチは現在まだ終了していないが、90kDaの細胞膜に豊富に存在する蛋白であることを突き止めた。

当星状细胞（肝脏特异性周细胞）经历所谓的激活并转化为肌成纤维细胞样细胞时，这会极大地改变这些细胞的代谢动力学，因此我们分析了相应表达的基因和蛋白质。首先，我们研究了作为增殖相关基因的细胞周期蛋白、细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(CK1)的表达。结果，CDK和CK1的表达几乎没有变化，但G1细胞周期蛋白例如细胞周期蛋白D和细胞周期蛋白E在星状细胞增殖之前表达。血小板源性生长因子（PDGF）是一种非常重要的生长因子，PDGF受体的表达及其自身的酪氨酸磷酸化也控制着星状细胞的增殖。此外，我们发现Akt/PKB作为一种新信号参与星状细胞中细胞周期蛋白的表达。此外，使用二维电泳的分析表明，肌动蛋白结合蛋白（例如 cofilin、calgizarrin 和 calcyclin）在活化的星状细胞中高度表达。虽然创建识别星状细胞的单克隆抗体并分析其抗原的方法尚未完成，但我们发现它是细胞膜中丰富的 90kDa 蛋白质。

项目成果

Kawada N: "Regulation by cAMP of STATI activation in hepatic stellate cells." Biochem.Biophys.Res.Commun.233. 464-469 (1997)

Kawada N：“cAMP 对肝星状细胞中 STATI 激活的调节。”

Shimizu I.: "Effect of sho-saiko-to;a Japanese herbal medicine,on hepatic fibrosis in rats." Hepatelogy. 29. 149-160 (1999)

Shimizu I.：“日本草药 sho-saiko-to 对大鼠肝纤维化的影响。”

Okuno M: "Retinoids exucerbate rat liver fibrosis by inducing the activeation of lateut TGFB in liver steuate cells" Hepatology. 26. 913-921 (1997)

Okuno M：“类维生素A通过诱导肝星形细胞中晚期TGFB的激活来加剧大鼠肝纤维化”《肝病学》。

Kawada N: "Effect of antioxidants,resveratrel,quercetin and N-acetyl cystein,on the function of hepatic stellate cells" Hepatology. 27. 1265-1274 (1998)

Kawada N：“抗氧化剂、白藜芦醇、槲皮素和 N-乙酰半胱氨酸对肝星状细胞功能的影响”肝病学。

Kawada N: "Cycin Expression Correlates with proliferation of rat Stellate Cell in Culture" J.Hepatol. in press

Kawada N：“细胞周期蛋白表达与培养物中大鼠星状细胞的增殖相关”J.Hepatol。